مطالعه خصوصیات بیوشیمی الاستاز حاصل از باکتری سودوموناس آئروجینوزا سویه ی PTCC۱۴۳۰
Publish place: New Cellular Biotechnology - Molecular، Vol: 2، Issue: 8
Publish Year: 1391
نوع سند: مقاله ژورنالی
زبان: Persian
View: 205
نسخه کامل این Paper ارائه نشده است و در دسترس نمی باشد
- Certificate
- من نویسنده این مقاله هستم
استخراج به نرم افزارهای پژوهشی:
شناسه ملی سند علمی:
JR_NCMBJ-2-8_009
تاریخ نمایه سازی: 21 اسفند 1400
Abstract:
سابقه و هدف: متالوپروتئازها کاربردهای فراوانی در صنعت از جمله در سنتز پپتید و آسپارتام دارند . با این وجود استفاده از آن ها با محدودیت هایی از قبیل ناپایداری به سبب اتولیز مواجه است. در تحقیق حاضر خصوصیات بیوشیمیایی یک متالوپروتئاز (الاستاز) حاصل از باکتری سودوموناس آئروجینوزا پس از خالص سازی مورد بررسی قرار گرفت. مواد و روش ها: با استفاده از کروماتوگرافی تمایلی پروتئین نوترکیب از E. coli خالص گردید. با رسم منحنی فعالیت آنزیم در دماهای مختلف وابستگی فعالیت به دما بررسی و دمای بهینه تعیین گردید. با استفاده از بافر میکس pH بهینه و با غیر فعال سازی حرارتی برگشت ناپذیر شیب غیرفعال سازی، t۱/۲ و پارامترهای ترمودینامیکی غیرفعال سازی تعیین گردید. یافته ها:دمای بهینه در هر سه غلظت ۰، ۵ و ۱۰ میلی مولار کلرید کلسیم برابر با ۶۰ درجه سانتیگراد تعیین گردید و pH بهینه ۵/۸ بدست آمد. شیب غیر فعال سازی حرارتی برگشت ناپذیر در دماهای ۵۵، ۶۰، ۶۵، ۷۰، ۷۵ و ۸۰ درجه سانتی گراد با افزایش دما افزایش یافت. در دماهای مذکور t۱/۲ بترتیب ۱۵۰، ۱۱۲، ۴۷، ۳۲، ۱۸، ۸ و ۴ دقیقه محاسبه گردید. مقادیر Ea ، D H # ، D S # و D G # بترتیب ۷/۳۷ ، ۰۲/۳۷ و ۶۱/۲۳ کیلوکالری بر مول و مقدار kinactivation برابر با ۱- s ۱۰۳ × ۴۹/۴ بدست آمد. نتیجه گیری: از نظر وابستگی به دما الاستاز سودوموناس آئروجینوزا یک آنزیم با خصیوصیات مابین مزوفیل ها و ترموفیل ها می باشد. کلسیم در میزان دمای بهینه بی تاثیر است، و این پیشنهاد می کند پایداری آنزیم مذکور غیر وابسته به کلسیم است.
Keywords:
Elastase , Thermal Stability , Kinetic Stability , pH. , الاستاز , پایداری حرارتی , پایداری سینتیکی , pH.
Authors
حسین رحمانی
Department of Biology, Faculty of Science, University of Guilan, Rasht, Iran
سید محسن اصغری
Department of Biology, Faculty of Science, University of Guilan, Rasht, Iran
ساناز ابراهیمی
Department of Biophysics, Faculty of Biological Sciences, Tarbiat Modares University, Tehran, Iran
افسانه صدر ممتاز
Department of Biophysics, Faculty of Biological Sciences, Tarbiat Modares University, Tehran, Iran
مجید تقدیر
Department of Biophysics, Faculty of Biological Sciences, Tarbiat Modares University, Tehran, Iran