بررسی وقوع عوامل ویروسی لکه حلقوی گوجه فرنگی (ToRSV) و لکه حلقوی نکروتیک درختان میوه هسته دار (PNRSV) در برخی گلستان های استان های تهران، البرز، مازندران و مرکزی

در طی فصول زراعی سال­های ۹۵-۱۳۹۴ به منظور تعیین پراکنش PNRSV و ToRSV در گل رز و علف­های هرز پیچک و شیرتیغی مجاور آن­ها در استان­های تهران، البرز، مازندران و مرکزی از ۶۰۰ نمونه برگ رز و ۵۰ نمونه برگ علف هرز بدون علایم و با علایم به­صورت کاملا تصادفی نمونه­برداری شد. توسط آزمون الایزای مستقیم DAS-ELISA نمونه­ها ارزیابی شدند. نتایج نشان داد گل رز در استان­های تهران، البرز، مازندران و مرکزی به ترتیب ۲۴/۳۹%، ۷/۳۰%، ۸/۴۴% و ۱/۳۸% به PNRSV و ۳۸%، ۶/۲۵%، ۳/۳۲% و ۳/۲۸% به ToRSV و علف­های هرز پیچک و شیرتیغی به ترتیب ۲۶% و ۱۸% به PNRSV و ToRSV آلوده بودند. نمونه­های آلوده با استفاده از بافر فسفات پتاسیم (۱/۷ pH=) حاوی ماده ضد اکسیداتیو بر روی گیاهان علفی در گلخانه مایه­زنی شدند. برای تایید آلودگی ویروسی نمونه­ها، از آزمون RT-PCR و پرایمر­های اختصاصی جهت تکثیر قطعات اختصاصی از طول ژنوم PNRSV و ToRSV در نمونه­های رز و گیاه محک استفاده شد. نمونه­هایی که در آزمون­های سرولوژیک آلوده به ویروس تشخیص داده شده بودند، با هر دو جفت آغازگر مورد استفاده واکنش دادند و قطعات ژنتیکی مورد انتظار با اندازه­های ۲۱۰ جفت باز مربوط به پروتئین پوششی PNRSV و ۵۰۰ جفت باز مربوط به پلیمرازToRSV  برای نمونه­های آلوده تکثیر شدند. در این بررسی برای اولین بار حضور عوامل ویروس PNRSV و ToRSV در گیاه رز و علف­های هرز مورد ارزیابی قرار گرفت.

Keywords:

پراکندگی , RT-PCR , DAS-ELISA , TAS-ELISA , گل سرخ , دامنه میزبانی