بررسی اثر هورمون محرک فولیکولی بر بقا و کلونی زایی سلول های بنیادی اسپرماتوگونی بز در کشت آزمایشگاهی

زمینه و هدف: سلول های بنیادی اسپرماتوگونی (SSCs: Spermatogonial Stem Cells) سلول هایی خاص هستند که دارای توانایی خودنوسازی و تمایز می باشند. این سلول ها نقشی اساسی در حفظ روند اسپرماتوژنز و باروری دارند. در این ارتباط، مطالعه حاضر با هدف بررسی اثر غلظت های مختلف هورمون محرک فولیکولی (FSH: Follicle Stimulating Hormone) بر کلونی زایی سلول های بنیادی اسپرماتوگونی بز در محیط آزمایشگاه انجام شد. روش بررسی: سلول های اسپرماتوگونی طی دو مرحله هضم آنزیمی از بیضه بز نابالغ جداسازی شدند. سلول های استخراج شده به مدت ۱۰ روز در چهار گروه کشت داده شدند. برای گروه کنترل کشت ساده سلول های اسپرماتوگونی در محیط DMEM (Dulbecco's Modified Eagle Medium) حاوی ۱ درصد آنتی بیوتیک و ۵ درصد FBS (Fetal Bovine Serum) انجام شد. در گروه های تیمار ۱، ۲ و ۳ نیز غلظت های مختلف FSH (۵، ۱۰ و ۲۰ واحد بین المللی بر میلی لیتر) به ترتیب به محیط کشت اضافه گردید. تعویض محیط های کشت هر ۷۲ ساعت انجام شد. ماهیت سلول ها توسط رنگ آمیزی ایمنوسیتوشیمی علیه آنتی ژن PGP۹.۵ تایید گردید. بلافاصله پس از جداسازی، درصد زنده مانی سلول ها، مساحت و تعداد کلونی های تشکیل شده در روزهای چهارم، هفتم و دهم پس از کشت به وسیله میکروسکوپ معکوس ارزیابی شدند. داده ها با استفاده از آزمون واریانس یک طرفه آنالیز گردیدند. یافته ها: نتایج نشان دادند که میزان زنده مانی سلول های اسپرماتوگونی پس از جداسازی ۳۲/۲±۴/۸۹ درصد بوده است. اثر FSH در تشکیل کلونی های سلول های اسپرماتوگونی وابسته به دوز بود. دوزهای ۵ و ۱۰ واحد بر میلی لیتر، مساحت و تعداد سلول های اسپرماتوگونی را افزایش داد؛ اما دوز ۲۰ واحد بر میلی لیتر موجب کاهش تشکیل کلونی ها گردید (۰۵/۰>P). نتیجه گیری: FSH می تواند محیط کشت مناسبی را به منظور مطالعه سلول های اسپرماتوگونی در محیط آزمایشگاه فراهم کند.

Keywords:

Spermatogenesis , Follicle Stimulating Hormone , Caprine , Spermatogonial Cells , اسپرماتوژنز , هورمون محرک فولیکولی , بز , سلول­ های اسپرماتوگونی