Cytotoxic Effect of Recombinant Fragaceatoxin C on Peripheral Blood Mononuclear Cells
Publish place: Journal of Advanced Biomedical Sciences، Vol: 10، Issue: 3
Publish Year: 1399
نوع سند: مقاله ژورنالی
زبان: Persian
View: 113
This Paper With 10 Page And PDF Format Ready To Download
- Certificate
- من نویسنده این مقاله هستم
استخراج به نرم افزارهای پژوهشی:
شناسه ملی سند علمی:
JR_JABS-10-3_011
تاریخ نمایه سازی: 1 مرداد 1402
Abstract:
زمینه و هدف: اکتینوپورین ها پروتئین ها و پپتیدهای سیتولیتک هستند که توسط شقایق دریایی تولید می شوند و باعث تشکیل منفذ در غشای لیپیدی می شوند. فراگاسیاتوکسین C یکی از اعضای این خانواده با وزن مولکولی ۲۰ کیلودالتون می باشد که به طور خاص به اسفنگومیلین در غشای پلاسمایی متصل و منافذ کاتیونی انتخابی به قطر دو نانومتر را در غشا تشکیل می دهد. هدف اصلی از این مطالعه بررسی فعالیت زیستی سم روی سلول های تک هسته ای خون محیطی(PBMCs) می باشد.
مواد و روش ها: وکتور بیانی pET۲۸a دربرگیرنده توالی کد کننده FraC به سلول مستعد اشرشیا کلی سویه BL۲۱ ترانسفورم گردید. سپس تخلیص پروتئین بوسیله کروماتوگرافی تمایلی انجام شد. تخلیص پروتئین توسط الکتروفورز ژل پلی آکریل آمید تایید شد. غلظت های مختلف از سم روی سلول های قرمز خون (RBC) تست شد و فعالیت همولیزی آن، با ثبت در طول موج ۷۰۰ نانومتر آنالیز شد. به منظور بررسی فعالیت ضدسلولی سم تخلیص شده، PBMCs با استفاده ازغلظت های متفاوت سم مورد تیمار قرار گرفتند. فعالیت سیتولیتیک پروتئین FraC روی سلول های تک هسته ای خون محیطی با استفاده از روش ) دی متیل تیازول– دی فنیل تترازولیوم بروماید(MTT و نوترال رد سنجیده شد.
نتایج: ارزیابی فعالیت همولیتیک نشان داد سم در تمام مراحل تخلیص فعالیت خود را حفظ می کند. نتایج بررسی فعالیت سیتولیتیک روی PBMCs نشان می دهد در غلظت های پایینFraC ، نسبت زنده مانی سلولها به گروه شاهد تغییر معنی داری نیافته است. فعالیت متابولیکی PBMCs فقط در غلظت های بالاتر توکسین (۸۰۰ و ۱۰۰۰ نانومولار) به طور قابل توجهی کاهش یافت. با توجه به نتایج تست تریپان بلو، داده های حاصل از روش نوترال رد نشان داد با افزایش غلظت سم، سنجش جذب نوترال رد در PBMCs به طور قابل توجهی کاهش می یابد.
نتیجه گیری: با وجود فعالیت ضد سلولی سم رویRBC ،FraC در غلظت های پایین دارای فعالیت سایتوتوکسیک روی سلولهای تک هسته ای خون محیطی نمی باشد.
Keywords:
Actinoporins , Fragaceatoxin C , Peripheral blood mononuclear cells , اکتینوپورین , فراگاسیاتوکسینC , سلول های تک هسته ای خون محیطی
Authors
لیلا داربرفرد
Department of Cellular and Molecular Biotechnology, Institute of Biotechnology, Urmia University, Urmia, Iran
مهدی ایمانی
Department of Cellular and Molecular Biotechnology, Institute of Biotechnology, Urmia University, Urmia, Iran
سید میثم ابطحی فروشانس
Department of Basic Sciences, Faculty of Veterinary Medicine, Urmia University, Urmia, Iran
مراجع و منابع این Paper:
لیست زیر مراجع و منابع استفاده شده در این Paper را نمایش می دهد. این مراجع به صورت کاملا ماشینی و بر اساس هوش مصنوعی استخراج شده اند و لذا ممکن است دارای اشکالاتی باشند که به مرور زمان دقت استخراج این محتوا افزایش می یابد. مراجعی که مقالات مربوط به آنها در سیویلیکا نمایه شده و پیدا شده اند، به خود Paper لینک شده اند :