جداسازی، کلونینگ و بیان سوپر آنتی ژن SPE استرپتوکوک دیس گالاکتیه با روش SDS page در بیماران مبتلا به پسوریازیس

زمینه و هدف: استرپتوکوک ها باکتری های گرم مثبت و بی هوازی هستند که به صورت زنجیره به دنبال هم قرار گرفته و از منابع متفاوت جدا می شوند. پروتئین speA یکی از فراورده های میکروبی است که از منابع مختلفی از جمله استرپتوکوکوس دیس گالاکتیه قابل استخراج است. پسوریازیس یک بیماری شایع، مزمن و عود کننده است که به خصوص در مراحل پیشرفته می تواند باعث عوارض متعدد جسمی و روحی در فرد بیمار گردد. این مطالعه به منظور جداسازی، کلونینگ و بیان سوپر آنتی ژن SPE استرپتوکوک دیس گالاکتیه با روش SDS page در بیماران مبتلا به پسوریازیس انجام شد. روش بررسی: این مطالعه توصیفی آزمایشگاهی روی ۶۰ نفر (۲۶ مرد و ۳۴ زن) مراجعه کننده به آزمایشگاه تشخیص طبی (۲۷ نفر دارای پسوریازیس ناشی از عامل استرپتوکوک دیس گالاکتیه و ۳۳ نفر غیرمبتلا) طی سال ۱۴۰۰ انجام شد. استرپتوکوک دیس گالاکتیه توسط آزمون های مختلف، تعیین هویت و جداسازی گردید. ژن speA توسط روش کلونینگ T-A با استفاده از وکتور PTG-۱۹ در درون میزبان اشریشیاکلی Xl۱ blue کلون گردید. بیان ژن کلون شده در کلونی های نوترکیب توسط روش SDS-PAGE بررسی شد. یافته ها: بررسی کلونی های نوترکیب وجود ژن speA را به اثبات رساند. بیان ژن speA در اشریشیاکلی X۱۱ blue توسط روش SDS-PAGE به اثبات رسید. نتیجه گیری: سوپرآنتی ژن speA باکتری استرپتوکوک دیس گالاکتیه می تواند توسط روش T-A کلونینگ با استفاده از وکتور PTG-۱۹ در درون میزبان اشریشیاکلیXl۱ blue به خوبی بیان و تخلیص شده و به عنوان کاندید واکسن بیماری پسوریازیس مورد کارآزمایی های مناسب قرار گیرد. روش های مبتنی بر میکروب و تولید باکتری های نوترکیب روش هایی مقرون به صرفه برای تولید پروتئین ها با رویکرد اهداف درمانی و واکسیناسیون هستند.

Keywords:

Streptococcus dysgalactiae , Escherichia coli , speA gene , Cloning , Superantigens , SDS-PAGE , استرپتوکوک دیس گالاکتیه , اشریشیاکلی , ژن speA , کلونینگ , سوپر آنتی ژن , SDS-PAGE