شناسایی و ردیابی ژن Tri۱۶ در فوزاریوم های مولد و غیرمولد سم T-۲ به روش PCR

اهداف: سم ۲ T- سمی ترین تریکوتسن است و اغلب توسط فوزاریوم اسپوروتریکیوئیدس تولید می شود. این مایکوتوکسین محصولات کشاورزی و به ویژه غلات را آلوده نموده و می تواند سبب بیماری های شدید و حتی مرگ در انسان شود. در مسیر بیوسنتز سم ۲ T- ژن ۱۶ Tri ، اسیل ترانسفرازی را کد می کند که تشکیل گروه جانبی استر را در کربن شماره ۸ کاتالیز می کند. هدف اصلی این مطالعه، طراحی روش مولکولی براساس ژن ۱۶ Tri به منظور شناسایی فوزاریوم­های مولد سم ۲ T- بود.   روش ها: در این مطالعه از نوع تجربی تعداد ۱۱۱ سویه فوزاریوم (شامل ۲۲ سویه استاندارد و ۸۹ ایزوله فوزاریوم) مورد بررسی قرار گرفت. پس از خالص سازی سویه ها و تهیه کشت انبوه در محیط پتیتودکستروزبراث (PDB) ، استخراج DNA آنها با استفاده از نیتروژن مایع و با کمک بافرهای لیزکننده و محلول های فنل- کلروفرم- ایزوآمیل الکل (PCI) صورت گرفت. با استفاده از پرایمرهای طراحی شده و انتخابی براساس ژن ۱۶ Tri و بهینه نمودن PCR این ژن در تمام سویه­های مولد و غیرمولد سم ۲ T- ردیابی شد.   یافته ها: تمام ایزوله های فوزاریوم مولد سم ۲ T- شامل ۴ ایزوله فوزاریوم اسپوروتریکوئیدس، یک گونه فوزاریوم پوئه و یک گونه فوزاریوم لانگستیه محتوی قطعه ژن ۱۶ Tri (۱۳۸۰ جفت باز) بودند. نتیجه گیری: با پروتکل مولکولی طراحی شده براساس ژن ۱۶ Tri ، می توان گونه های مهم مولد سم ۲- T مانند فوزاریوم اسپوروتریکیوئیدس و فوزاریوم لانگستیه را شناسایی کرد. همچنین می توان گونه هایی از فوزاریوم که به طور ضعیف مولد ۲- T هستند را نیز شناسایی نمود.

Keywords:

فوزاریوم , مایکوتوکسین ۲T- , تریکوتسن , ژن ۱۶Tri , واکنش زنجیره ای پلیمراز (PCR)