بررسی خصوصیات مولکولی و بیولوژیک ویروس موزاییک کاهو Lettuce mosaicvirus

ویروس موزاییک کاهو Lettuce mosaic virus (LMV) مخربترین ویروس کاهو است که دارای گسترش جهانی می باشد.در این تحقیق ، تعدادی نمونه کاهو با علائم آلودگی ویروسی شامل موزاییک ، پیسک ، بدشکلی برگ ها، کوتولگی و عدم تشکیل تاج طبیعی از مزارع مختلف استان تهران جمع آوری شد. نمونه ها با آزمون الایزای مستقیم تست شدند. چهار ایزوله از ویروس انتخاب و خصوصیات بیولوژیک آنها روی گیاهان محک مختلف تعیین شد که نتایج حاصل از آن شامل : گسترش لکه های موضعی کلروتیک روی سه گونه سلمک Chenopodium quinoa، C. amaranticolor و C. album وپس از آن علائم سیستمیک شامل روشن شدن رگبرگ ها، بدشکلی برگها و توقف رشد بوته ظاهر شد، روی گل تکمه ایGomphrena globosa لکه های موضعی نکروتیک ۳-۲ هفته پس از مایه زنی ایجاد شد اما سیستمیک نشدتوتون Nicotiana benthamiana علایم موزاییک نشان داد اما لوبیا Phaseolus vulgaris، توتون Nicotiana tabacum وتاتوره .Datura metel, Datura stramoniumآلوده نشدند. همه ایزوله ها کاهوی حساس رقم Terocadero را آلوده کردند، دو ایزوله علاوه بر رقم حساس ، بر مقاومت ژن mol۱ غلبه کرده و کاهوی رقم Mantilia را هم آلوده کردند، هیچیک از ایزوله ها رقم Salinas ۸۸ محتوی ژن مقاوم mol۲ را آلوده نکردند. یک ایزوله از ویروس روی سلمک Chenopodium quinoa تکثیر پیدا کرد و در گلخانه عاری از حشرات در دمای ۲۵-۲۰ درجه سانتیگراد نگهداری و پس از ۳-۲ هفته خالص سازی شد. آنتی سرم پلی کلونال ویروس پس از چند تزریق وریدی و عضلانی به خرگوش بدست آمد. تیتر آن ۱۰۲۴:۱ تعیین شد. با این آنتی سرم نشت دوطرفه در آگار انجام و باند رسوب مشاهده شد. الکتروفورز پروتئین ۱ و لکه -برداری پروتئین ۲ وزن پروتئین پوششی را ۲۹ کیلودالتون نشان دادند. ویروس با آزمون IC-RT-PCR ردیابی و قطعه ای به طول ۱۰۶۰ جفت باز تکثیر شد.

Keywords:

ویروس موزاییک کاهو , الایزا , ژن , ایمنوکپچر آر تی پی سی آر , الکتروفورز