کلونینگ مولکولی سابیونیت های آلفا و بتای هورمون لوتئینیزه با استفاده از توالیIRES در شاتل وکتورPEGFP-N۱ و تطابق آن با بانک ژنی

مقدمه و هدف:هورمون های گلیکوپروتئینی ترشحشده از هیپوفیز قدامی از دو زیرواحد آلفا و بتا با اتصال غیرکوالان تشکیلشدهاست، زیرواحد الفا در هورمون های این خانواده یکسان است و تفاوت در فعالیت بیولوژیک این دسته ازهورمون ها به زیرواحد بتای آنها ارتباطدارد. با توجه به عدم دسترسی مناسب به هورمون و امکان ایجاد آلودگی، در این تحقیق تلاششد تا با استفاده از توالیIRES زیرواحدهای آلفا و بتای این ژن بهمنظور استفاده درمانی، در پلاسمید بیانی pEGFP-N۱کلون شود. مواد و روش ها:تحقیق با طراحی تجربی انجامگرفت،بهمنظور کلونینگ زیرواحدهای آلفا و بتای هورمون LH، ابتدا توالی نوکلوتیدی طراحیشده در پلاسمید حاملpGEM-BIسنتز شد. توالی مورد نظر در سایت SmaI پلاسمیدبیانی pEGFP-N۱،سابکلون شد. پلاسمید حاصل باانجام هضم آنزیمی و PCR،مورد تایید قرارگرفت. نتایج:آنالیزآنزیمیو PCRنشانداد که پلاسمید-α-IRES-β pEGFP-Nl، حاوی توالی صحیحی بوده، با توالی ژن مورد نظر در بانک ژن تطابقدارد. نتیجهگیری:اینپلاسمیدبهدلیلساختارصحیحبرایانتقالبهسیستمیوکاریوتیوارزیابیبیان،مناسب است.

Keywords:

سابکلونینگ , هورمون LH , وکتور بیان