بررسی اثرات سیتوتوکسیک پروتئین هیبرید نوترکیب StxA۱-GM-CSFبر رده های مختلف سلول های سرطانی دارای گیرنده GM-CSF

چکیده   سابقه و هدف   برنامه های جدیدی برای درمان سرطان مدنظر محققین بوده و یکی از این رویکردها، تحویل هدف دار مواد سمی به سلول های سرطانی می باشد. در ایمونوتوکسین ها از قسمت سیتوتوکسیک توکسین ( دومین کاتالیتیک) باکتری یا گیاه و حذف قسمت اتصال دهنده و جایگزینی آن با یک لیگاند اختصاصی برای یک گیرنده سلولی استفاده می شود. در مطالعه قبلی یک ایمونوتوکسین جدید، شیگاتوکسین CSF GM ، طراحی و در سیستم باکتریایی از طریق مهندسی ژنتیک بیان شد. در تحقیق حاضر فعالیت سیتوتوکسیک شیگاتوکسین CSF GM بررده های مختلف سلول های سرطانی که گیرنده فاکتور محرک کلونی گرانولوسیت ماکروفاژ ( CSF GM ) را بیان می کنند مورد مطالعه قرار گرفت. به علاوه اثر آنتی بادی ضد گیرنده GM-CSF در مهار فعالیت سیتوتوکسیک شیگاتوکسین CSF GM بر رده های مختلف سلول های سرطانی دارای گیرنده مذکور ارزیابی شد.   مواد و روش ها   مطالعه انجام شده از نوع تجربی بود. رده های مختلف سلول های سرطانی خونی و جامد که گیرنده فاکتور محرک کلونی گرانولوسیت ماکروفاژ (GM-CSF) را بیان می کردند، در محیط کشت RPMI کشت داده شدند.سیتوتوکسیسیتی با استفاده از روش های رنگ سنجی تریپان بلو و MTT ارزیابی شد. اثر دراز مدت سیتوتوکسیسیتی با استفاده از سنجش کلونوژنیک برای رده های سلول های سرطانی جامد انجام شد.گیرنده GM-CSF با استفاده از آنتی بادی آنتی CSF GM مهار شد.   یافته ها   در بین رده های سلولی تومورهای خون ساز، K۵۶۲ و در بین رده های سلولی تومورهای جامد، LS۱۷۴T بیشترین سیتوتوکسیسیتی را در غلظت ng/ml ۴۰ و در۲۴ ساعت نشان دادند.   PC-۳ ، MCF-۷ و DU۱۴۵ بیشترین توکسیسیتی را در زمان ۷۲ ساعت و در غلظت ng/ml ۱۶۰ نشان دادند. خنثی سازی StxAl-GM-CSF(Neutralization) با آنتی بادی GM-CSF منجر به از بین رفتن اثر توکسیسیتی شد.   نتیجه گیری   پروتئین نوترکیب هیبرید جدید، شیگاتوکسین CSF GM ، فعالیت بیولوژیک خود را حفظ نموده و بر رده های مختلف سلول های سرطانی که گیرنده فاکتور محرک کلونی گرانولوسیت ماکروفاژ (GM-CSF) را بیان می کردند به طور اختصاصی اثر سیتوتوکسیسیتی را اعمال می کند و می تواند به عنوان یک رویکرد جدید برای درمان سرطان در نظر گرفته شود.   کلمات کلیدی: شیگاتوکسین، محرک کلونی گرانولوسیت، ماکروفاژ، سیتوتوکسیسیتی، سلول های سرطانی

Keywords:

Shiga-toxin , Granulocyte macrophage - colony stimulating factor ( GM–CSF ) , Cytotoxicity , Cancer cells , شیگاتوکسین , محرک کلونی گرانولوسیت , ماکروفاژ , سیتوتوکسیسیتی , سلول های سرطانی