کلونینگ ژن هورمون رشد انسانی نوترکیب در باکتری لاکتوکوکوس لاکتیس 3900 NZ
Publish place: 3rd Iranian Agricultural Biotechnology Conference
Publish Year: 1391
نوع سند: مقاله کنفرانسی
زبان: Persian
View: 1,709
متن کامل این Paper منتشر نشده است و فقط به صورت چکیده یا چکیده مبسوط در پایگاه موجود می باشد.
توضیح: معمولا کلیه مقالاتی که کمتر از ۵ صفحه باشند در پایگاه سیویلیکا اصل Paper (فول تکست) محسوب نمی شوند و فقط کاربران عضو بدون کسر اعتبار می توانند فایل آنها را دریافت نمایند.
- Certificate
- من نویسنده این مقاله هستم
استخراج به نرم افزارهای پژوهشی:
شناسه ملی سند علمی:
AGRIBIOTECH03_108
تاریخ نمایه سازی: 27 تیر 1392
Abstract:
لاکتوکوکوس لاکتیس یکی از بهترین باکتریهای اسید لاکتیک مطالعه شده برای کارهای ژنتیکی میباشد L. Lactis برای تولید پروتئینهای زیستی مفیدوبرای انتقال DNA پلازمیدی به سلولهای یوکاریوتی مناسب میباشد. سیستم بیان ژن در این باکتری که کنترل شده با نایزین میباشد، یکی از موفقترین وگسترده ترین ابزار استفاده شده برای تنظیم بیان ژن در باکتریهای گرم مثبت میباشد. این سیستم بیان تضمین میدهد که نه ژن مقاومت به آنتی بیوتیکونه آنتی بیوتیک در پروتئین بدست آمده حضور ندارد . در این مطالعه از L. lactis NZ3900 که یک سویه جهش یافته با حذف lacF میباشد به عنوان میزبان استفاده شد. قطعه ژنی کدکننده هورمون رشد با روش PCR تکثیر شد سپس با دو آنزیم محدودالآثر Nco1 و Sac1 هضم دوگانه روی ژن و وکتور انجام شد و ژن پایین دست پروموتور القاءشونده با نایزین nisA در پلازمید 8149 pNZ توسط آنزیم T4DNA لیگاز الحاق یافت. سپس پلازمید نوترکیب به روش الکتروپوریشن به داخل L. lactis منتقل شد. حذف ژن lacF باعث عدم رشد این سویه بر روی لاکتوز میشود مگر اینکه این ژن از طریق پلازمید فراهم شود غربالگری در این سیستم براساس توانایی رشد بر روی لاکتوز میباشد. محیط اختصاصی که برای غربالگری کلنیهای Lac + استفاده میشود محیط الیکر میباشد کلنی هایی که وکتور را دریافت کرده باشند بر روی این محیط زرد می شوند.
Keywords:
Authors
حمید زرکش اصفهانی
دانشیار بخش میکروبیولوژی، گروه زیست شناسی، دانشگاه اصفهان
رحمان امام زاده
استادیار بخش بیوشیمی، گروه زیست شناسی، دانشگاه اصفهان
زهرا اعتمادی فر
استادیار بخش میکروبیولوژی، گروه زیست شناسی، دانشگاه اصفهان
شیوا شهبازی
دانشجوی کارشناسی ارشد میکروبیولوژی دانشگاه اصفهان
مراجع و منابع این Paper:
لیست زیر مراجع و منابع استفاده شده در این Paper را نمایش می دهد. این مراجع به صورت کاملا ماشینی و بر اساس هوش مصنوعی استخراج شده اند و لذا ممکن است دارای اشکالاتی باشند که به مرور زمان دقت استخراج این محتوا افزایش می یابد. مراجعی که مقالات مربوط به آنها در سیویلیکا نمایه شده و پیدا شده اند، به خود Paper لینک شده اند :