همسانه سازی و بیان ژن پروتئین پوششی ویروس PVX در باکتری به منظور تولید حامل داروهای ضد سرطان
Publish Year: 1402
نوع سند: مقاله ژورنالی
زبان: Persian
View: 31
This Paper With 11 Page And PDF Format Ready To Download
- Certificate
- من نویسنده این مقاله هستم
استخراج به نرم افزارهای پژوهشی:
شناسه ملی سند علمی:
JR_GEB-12-2_016
تاریخ نمایه سازی: 24 شهریور 1403
Abstract:
استفاده از ویروسهای گیاهی به عنوان حاملهای داروهای ضد سرطان در پزشکی روز به روز درحال افزایش است. تشخیص ویروسها با استفاده از آنتی بادیهای اختصاصی نیز اهمیت ویژه ای برای کنترل بیماریهای گیاهی خصوصا در برنامه تولید بذر سیبزمینی دارد. یکی از مهمترین ویروسهای سیب زمینی (PVX) Potato X Potexvirus با گستره جهانی و جزو اولین ویروسهای گیاهی مورد استفاده به عنوان حامل داروهای ضد سرطانی میباشد. در این تحقیق به منظور تولید پیکره های PVX، ژن Coat protein (CP) آن بصورت نوترکیب تولید گردید. ابتدا، واکنش RT-PCRبا استفاده از آغازگرهای اختصاصی حاوی سایت برشی برای تکثیر CP انجام گرفت. الکتروفورز محصول PCR بر روی ژل آگارز، قطعه تکثیر شده به طول bp ۷۱۴ را تایید کرد. ژن CP و پلاسمید pGBKT۷ توسط آنزیمهای BamHIو EcoRI برش داده شدند و پس از خالص سازی لیگاسیون بین آنها صورت گرفت. پلاسمید نوترکیب pGBKT۷ -CPPVX با الکتروپوراسیون به باکتری E. coli منتقل و در آن تکثیر گردید. پس از گزینش باکتریهای حاوی پلاسمید نوترکیب به کمک PCR و استخراج پلاسمید از آنها، توالی یابی درست بودن توالی ژن کلون شده را تایید کرد. در ادامه ژن CP در پلاسمید بیانیpET-۲۱a به روش برش و لیگاسیون همسانه سازی شد. پلاسمید نوترکیب به سویه BL۲۱ باکتری E. coli منتقل و کشت گردید. با اضافه کردن IPTG در محیط کشت باکتری تولید پروتئین CP از روی پلاسمید انجام و پروتئینهای باکتری استخراج شد. الکتروفورز پروتئین، بیان شدن CP را نشان داد. این پروتئین پس از خالصسازی میتواند به عنوان حامل داروهای ضد سرطان کاربرد داشته باشد.
Keywords:
Cloning , Coat protein , drug carrier , PVX , protein expression , PVX , Coat protein , بیان پروتئین , همسانه سازی , حامل دارو
Authors
لیلا پورهنگ
Biotechnology Department, Faculty of Agriculture, Azarbaijan Shahid Madani University, Tabriz, Iran
مقصود پژوهنده
Biotechnology Department, Faculty of Agriculture, Azarbaijan Shahid Madani University, Tabriz, Iran
اکبر شیرزاد
Department of plant protection, Faculty of Agriculture, Azarbaijan Shahid Madani University, Tabriz, Iran
مراجع و منابع این Paper:
لیست زیر مراجع و منابع استفاده شده در این Paper را نمایش می دهد. این مراجع به صورت کاملا ماشینی و بر اساس هوش مصنوعی استخراج شده اند و لذا ممکن است دارای اشکالاتی باشند که به مرور زمان دقت استخراج این محتوا افزایش می یابد. مراجعی که مقالات مربوط به آنها در سیویلیکا نمایه شده و پیدا شده اند، به خود Paper لینک شده اند :
