استفاده از روش Real-Time PCR جهت شناسایی HPV-۱۶ و HPV-۱۸ به عنوان جایگزینی برای روش کشت در سلولهای موش

مقدمه و هدف: سرطان سرویکس دومین سرطان شایع زنان در جهان می باشد و نقش ویروس HPV در سبب شناسی آن کاملا اثبات شده است. یکی از روش های رایج تشخیص این ویروس، کشت در سلول های تغییر یافته موش که مستعد پذیرش ویروس شده اند می باشد. استفاده از این روش، مانند بسیاری دیگر از روش های وابسته به کشت، پر هزینه و وقت گیر می باشد. هدف از این مطالعه تعیین فراوانی آلودگی با تیپ ۱۶و ۱۸ویروس پاپیلومای انسانی در ترشحات سرویکس زنان با استفاده از روش Real-Time PCR می باشد. مواد و روش کار: ۱۶۰ نمونه پاپ اسمیر بطور تصادفی از میان مراجعین به مراکز آزمایشگاهی مختلف در سطح شهرستان رشت در طی زمان یکسال جمع آوری شد. پس از استخراج DNA از تمامی نمونه ها ، تشخیص حضور ویروس بر اساس ژن E۷و E۱ بوسیله Real-Time Taqman assay PCR آنالیز شد. نتایج و بحث: نتایج تحقیق نشان داد از ۱۶۰ نمونه پاپ اسمیر مورد مطالعه، ۱۷.۵% به HPV ۱۶ & ۱۸ مبتلا بودند. فراوانی ابتلا به HPV۱۸ (۵%)، HPV۱۶ (۱۲.۵%) و عفونت همزمان با دو تیپ ۱۶و ۱۸ (۱.۲۵%) مشاهده گردید. بررسی فراوانی ابتلا به هرکدام از دو تیپ ویروس و مقایسه آن با فراوانی ابتلای همزمان به هر دو تیپ، نشان دهنده دقت و کارآمدی این روش بود. در روش کشت در سلول موش، تعیین فراوانی ابتلا به دو تیپ ویروس بطور همزمان، بسیار دشوار و گاها غیر ممکن می باشد.