همسانه سازی راه انداز اختصاصی پاتاتین به همراه ناحیه ،UTR ا' 5،پپتید نشانه از سیب زمینی

امروزه استفاده از راه اندازهای اختصاصی از مهمترین فاکتورهای درگیر در ساخت سازه های ژنی برای بیان اختصاصی پروتئین های نوترکیب در سیستم های بیانی می باشد. پاتاتین یک گروه از گلیکوپروتئین های سیب زمینی می باشد که به وسیله یک خانواده چند ژنی کد می شود و بیش از 40 % پروتئین های محلول غده سیب زمینی را به خود اختصاص می دهد و میتوان گفت قوی ترین پروموتر اختصاصی در غده می باشد. این پروموتر برای بیان پروتئین های مختلف در غده های سیب زمینی جهت افزایش مقاومت به آفات و تنش ها، تولید غده های غنی سازی شده نسبت به ویتامین ها و تولید داروهای زیستی در غده ها استفاده شده است. هدف از این تحقیق جداسازی پروموتر اختصاصی پاتاتین از واریته های موجود در ایران و استفاده از آنها می باشد. در این تحقیق ابتدا پرایمرهای اختصاصی طراحی و با استفاده از تکنیک PCR قطعه مد نظر تکثیر شده و پس از استخراج قطعه از ژل، واکنش اتصال ترانسفورماسیون باکتری E.coli سویه DH5α انجام شد. سپس استخراج پلاسمید از باکتری های ترانسفورمنت صورت گرفته و حظور قطعه مورد نظر در پلاسمیدها بوسیله هضم آنزیمی تأیید شد. درنهایت پلاسمیدهای نوترکیب توالی یابی شدند و نتایج حاصل از همردیفی وجود پلی مورفیسم تک نوکلوتیدی (SNP) وحضور احتمالی یک قطعه ترانسپوزون داخل قطعه پروموتر را نشان دادند. این مسأله از این جهت که این توالی، بومی اکوسیستم ایران بوده و برای اولین بار جدا گردیده، حائز اهمیت فراوان است.

Keywords:

, 5 'UTR , پروموتر اختصاصی , پاتاتین , سیب زمینی پپتید نشانه