کلونینگ و انتقال ژن فایتوئین سنتاز گیاه نرگس به کاهو

کارتنوئیدها یکی از گسترده ترین کلاس های ترکیبات غذایی از لحاظ تنوع غذایی هستند. نقش کاربردی کارتنوئیدها در تغذیه انسان به عنوان آنتی اکسیدان و پیش ماده ویتامین A سبب شده که مصرف پیوسته آنها موجب ایمنی در برابر تعدادی از بیماری ها گردد. بنابراین به خاطر اهمیت کارتنوئیدها، دستکاری ژن های رمزکننده ی آنزیم های مسیر سنتز این مواد از اهمیت فوق العاده ای برخور می باشد. این طرح برای بررسی پتانسیل گیاه خوراکی کاهو برای افزایش میزان کارتنوئیدها از طریق بیان بیشینه ی کلیدی ترین آنزیم مسیر سنتز کارتنوئیدها، یعنی فایتوئین سنتاز، انجام می گیرد. برای اینکار ابتدا cDNAی ژن فایتوئین سنتاز که از گیاه نرگس جداسازی گردیده است، در وکتور مخصوص انتقال ژن به هسته از طریق تفنگ ژنی، کلون گردید. همچنین این ژن در وکتورهای مخصوص انتقال ژن به کلروپلاست قرار می گیرد تا انتقال ژن به هر دو اندامک هسته و کلروپلاست انجام پذیرد.از آنجا که کشت بافت و اندامزایی اساس موفقیت در هر آزمایش انتقال ژن و بویژه در انتقال ژن به کلروپلاست می باشد، بنابراین،ما روش بسیار کارآمدی برای کشت بافت و باززایی از قطعات برگ، برای چندین واریته کاهو نیز ابداع کردیم. آزمایشات اولیه از طریق انتقال و بیان موقت ژن gus با استفاده از تفنگ ژنی، موید پتانسیل بالای قطعات برگ برای انتقال ژن با این روش می باشد.

Keywords:

فایتوئین سنتاز , کارتنوئید , انتقال ژن , کاهو