تأثیر روش های مختلف لیز باکتری بر بازده استخراج پروتئین های محلول نوترکیب

به دنبال بیان هترولوگ ژن کراتیناز کلون شده در باکتری (BL21(DE3، گام بعدی، لیز سلولی جهت استخراج پروتئین محلول می باشد. یافتن مؤثرترین روش تخریب سلول، بازده استخراج پروتئین و میزان تجمع پروتئین های محلول به صورت توده های نامحلول را به شدت تحت تأثیر قرار می دهد. پس از بیان کراتیناز نوترکیب با وزن مولکولی تقریبی 45 کیلودالتون در سویه بیانی، جهت لیز باکتری گرم منفی E.coli BL21 سه روش سونیکاسیون با امواج اولتراسونیک، فریز و ساییدن با ازت مایع و لیز به کمک بیدهای شیشه ای مورد استفاده قرار گرفت و میزان پروتئین های محلول استخراج شده به ازای توده باکتری یکسان، توسط SDS-Page آنالیز گردید و نتایج نشان دهنده این است که روش بیدهای شیشه ای بازده کمتری نسبت به دو روش دیگر داشته است.

Keywords:

لیز باکتری , سونیکاسیون , ازت مایع , بیدهای شیشه ای , کراتیناز نوترکیب