مقایسه ارزش تشخیصی عفونت مایکو باکتریوم توبر کلوزیس به کمک روشFlash PCR نسبت به روش مرسوم کشت

رنگ آمیزی های زیل نلسون ، فلویورسنت و نیز کشت، روش های استاندارد تشخیص بیماری سل هستند. در این تحقیق کارایی روش Flash PCR با روش مرسوم کشت، مقایسه شده است. تعداد 56 نمونه خلط از بیماران سل پس ازارزیابی با روش ذیل نلسن و کشت در لوون اشتاین جانسن،مورد استخراج DNA به روش چلکس قرار گرفتند. جهت بررسی مولکولی از کیت مخصوص Flash PCR که محتوی پرایمرها برای تکثیر ژن IS6110 و پروب ها بود، استفاده شد. کنترل مثبت و کنترل منفی موجود در کیت بکار گرفته شده و دستگاه MTC410، جهت تکثیر و دستگاه FD-12 جهت بررسی نتایج مورد استفاده قرار گرفتند. علاوه بر این نمونه ها با کمک ژل آگارز نیز الکتروفورز شدند. از 56 نمونه خلط بیماران مشکوک مراحعه کننده به مرکز سل، تعداد 20نمونه در ارزیابی میکروسکوپی و کشت مثبت و 36 نمونه منفی بودند. بررسی مولکولی با استفاده از روش FLASH-PCRنیز مشخص کرد که تمامی 20 نمونه مثبت، در این روش مولکولی نیز مثبت شدند.ضمنا،3 نمونه خلط که با روش کشت و رنگ امیزی منفی شده بودند در روش FLASH-PCR مثبت شدند . یکی از 3 بیمار مورد بحث با نظر پزشک و با دریافت آنتی بیوتیک ایزونیازید تحت درمان قرار گرفت. تمامی نتایج با کمک الکتروفورز معمول نیز تایید گردیدند.مواردی که احتمالا بدلیل تعداد باکتری اندک در نمونه یا نقص در نمونه برداری، منفی می شوند، با روش FLASH-PCR امکان مثبت شدن آنها وجود دارد. بنابراین، با توجه به هزینه اندک، برای استفاده روتین پیشنهاد می شود.

Keywords:

بیماری سل , مایکوباکتریوم توبر کلوزیس , تشخیص , روش Flash PCR , روش کشت