شناسایی سرولوژیکی و مولکولی ویروس موزاییک کدو در مزارع کدوییان استان های خراسان رضوی و شمالی

موزاییک رگبرگ روشنی خربزه از طریق تشکیل نوارهای سبز رنگ در اطراف رگبرگ در جدایه های مختلف خربزه قابل شناسایی است. این بیماری به وسیله ویروسی که دارای 30nm طول است، به وجود می آید. به منظور بررسی پراکندگی و تعیین موقعیت تاکسونومیکی جدایه های SqMV در طی ماه های خرداد لغایت مهر ماه 1388 تعداد 270 نمونه گیاهی از مزارع کدوییان واقع در استان خراسان رضوی و شمالی جمع آوری گردید. آلودگی نمونه های با آزمون DAS-ELISA به وسیله آنتی بادی چند همسانه ای اختصاصی SqMV اهدایی از شرکت Agdia مورد بررسی قرار گرفت. تعداد 46 نمونه از 270 نمونه آلوده به SqMV بودند. از میان نمونه های آلوده به این ویروس، هشت نمونه، براساس دامنه میزبانی و منطقه برای بررسی های بیشتر و تلقیح مکانیکی بر روی گیاهان محک در شرایط گلخانه انتخاب گردیدند. یک جدایه از تربت جام به منظور تکثیر بخشی از ژن پروتیاز کوفاکتور انتخاب شد. قطعه مذکور (226bp) از طریق واکنش زنجیره ای پلیمر از - نسخه برداری معکوس با استفاده از RNA کل استخراج شده از نمونه های آلوده با کمک آغازگرهای اختصاصی تکثیر و پس از همسانه سازی، تعیین ترادف گردید. جهت تعیین جایگاه تکاملی جدایه ایرانی در مقایسه با جدایه های مختلف دنیا درخت فیلوژنتیکی توسط نرم افزار MEGA4×1 رسم گردید. نتایج حاصله بیانگر آن است که بر مبنای ترادف نوکلیوتیدی، جدایه ایران بیشترین تشابه را با جدایه گزارش شده از ژاپن به میزان 97 درصد نشان داد.

Keywords:

ویروس موزاییک کدو , RT-PCR , Comovirus