بررسی بیان ژن های فاکتور نوروتروفیک در سلول های بنیادی چربی انسانی کشت شده در محیط های سرمدار و بدون سرم

سابقه و هدف: از آنجا که سرم گاوی در انسان ایمونولوژیک بوده و به هنگام پیوند خطر انتقال عفونت را به همراه دارد، در این تحقیقسرعت تکثیر، بقاء و بیان ژن های نوروتروفینی در سلول های بنیادی چربی انسانی کشت داده شده در محیط بدون سرم و سرمدار بایکدیگر مقایسه شدند.مواد و روشها: در این مطالعه تجربی سلول های بنیادی از بافت چربی زیرجلدی ناحیه شکم 15 خانم سزارینی استخراج شده و درمحیط کشت α-MEM حاوی 10 درصد سرم جنین گاوی یا محیط فاقد سرم کشت داده شدند. بنیادی بودن سلول های پاساژ چهارم با روش فلوسایتومتری و قابلیت تمایزشان به سلول های چربی و استخوان تایید شد. تکثیر و بقاء سلولی، به ترتیب با روشهای هموسایتومتری و MTT بررسی شد. همچنین، میزان بیان ژنهای نوروتروفیک با روش RT-PCR ارزیابی گردید. نتایج: سلولها به نشانگرهای CD105, CD90, CD73, CD44 پاسخ مثبت داده و به نشانگرهای CD34 و CD45 پاسخ منفی دادند و توانایی تمایز به سلول های چربی و استخوان را داشتند. بقاء و تکثیر سلول های کشت شده در محیط سرم دار به مدت 48 ساعت نسبت به محیط بدون سرم، به طور معنی داری افزایش یافته بود. سرم باعث افزایش معنی داری در میزان بیان ژن های BDNF و NT-3 نسبت بهسلول هایی که در محیط بدون سرم کشت داده شده بودند، گردید.نتیجه گیری: با حذف سرم و بهینه سازی شرایط کشت میتوان سلول های مناسبتری برای پیوند فراهم کرد. نتایج به دست آمده را می توانمقیاسی جهت یافتن جایگزین مناسب برای سرم گاوی قرار داد.

Keywords:

سلول های بنیادی چربی انسان , فاکتورهای نوروتروفیک , تکثیر , بقاء , سرم