ردیابی و تشخیص هم زمان دو ویروس مهم بذرزاد لوبیا ‭( BCMV ‬و ‭BCMNV) ‬با استفاده از روش ‭Multiplex Reverse Transcription-PCR ‬جهت بکارگیری در برنامه گواهی بذر کشور

ویروس موزاییک معمولی لوبیا ‭(BCMV) ‬و ویروس موزاییک معمولی نکروتیک لوبیا ‭(BCMNV) ‬در اغلب مناطق کشت لوبیا در دنیا از پراکنش گسترده ای برخوردار میباشند. آلودگی مزارع لوبیا و خسارت ناشی از این دو پوتی ویروس ‭potyvirus) (‬از مناطق مختلف کشت و پرورش لوبیا در ایران گزارش شده است. در صورت استفاده از روشهای متعارف تشخیصی مثل سنجش سرولوژیکی الایزا ‭( ELISA ) ‬آلودگی توام به این دو ویروس در نمونه های لوبیای آلوده مشاهده میگردد. روشهای تشخیص مولکولی برای شناسایی این دو ویروس و سایر ویروسهای آلوده کننده لوبیا راه اندازی شده اند، اما تاکنون روش ‭Multiplex RT- PCR ‬برای تشخیص همزمان این دو ویروس در ایران و در یک نمونه ارایه نشده است. بنابراین هدف از این تحقیق راه اندازی و توسعه سیستم ‭Multiplex RT- PCR ‬برای تشخیص همزمان این دو ویروس در یک نمونه است. تلفیقی از پرایمرهای اختصاصی و پروب های مختلفی برای تشخیص دو ویروس ‭BCMV‬و ‭BCMNV ‬طراحی و بهینه سازی گردید. واکنشهای مولکولی مختلفی بصورت تکی ‭ (uniplex)‬و چندتایی بطور همزمان جهت رفع مشکلات و کاستی های مراحل تشخیص همزمان این دو ویروس بصورت تقاطعی صورت گرفت. واکنشهای تشخیص همزمان این دو ویروس با اندک تفاوتی در واکنشهای تکی و چندتایی موفقیت آمیز بود. بکارگیری این روش در تشخیص همزمان چند ویروس نه تنها در بهبود و توسعه روشهای تشخیصی از نقطه نظر کاهش در زمان و هزینه آزمایشات چند مرحله ای موثرند، بلکه به عنوان یک ابزار در دسترس جهت مطالعات اکولوژیکی و اپیدمیولوژیکی ، بررسی سلامتی بذور از عوامل بیماریزای بذر زاد ، روابط متقابل میزبان و عامل بیماریزا مفید واقع خواهند شد، بخصوص در حالتی که یک میزبان ( لوبیا) به هر دو عامل بیماریزا آلوده شده باشد. واژه های کلیدی : تشخیص مولکولی-آزمون مالتی پلکس پی سی ار- ویروس لوبیا ، آلودگی همزمان