Cloning and Expression of Bst DNA Polymerase I Gene in E. coli BL۲۱
Publish place: Biological Journal of Microorganisms، Vol: 8، Issue: 32
Publish Year: 1398
نوع سند: مقاله ژورنالی
زبان: Persian
View: 464
This Paper With 8 Page And PDF Format Ready To Download
- Certificate
- من نویسنده این مقاله هستم
استخراج به نرم افزارهای پژوهشی:
شناسه ملی سند علمی:
JR_BJM-8-32_004
تاریخ نمایه سازی: 19 اردیبهشت 1400
Abstract:
خلاصه DNA پلیمرازها علاوه بر کاربردشان در همسانه سازی و تصحیح ، در انواع تکنیک های ملکولی مانند تکثیر DNA ، جهش های نقطه ای ، توالی یابی DNA ، انواع مختلف PCR ، LAMP و ...اهمیت دارند. پس از کشف PCR تلاش هایی مبنی بر تشخیص و جداسازی آنزیم های مقاوم به دماهای بالا که توانایی تکثیر موثر DNA در دماهای بالا انجام گرفت. در این پژوهش ، سویه Geobacillus stearothermophilus strain ۱۰ به منظور همسانه سازی ژن رمزگذار Bst DNA Polymerase استفاده گردید. پس از استخراج DNA باکتری ، ژن مورد نظر با استفاده از پرایمر های طراحی شده و با روش PCR تکثیرگردید. همسانه سازی ژن رمزگذار آنزیم در ناقل بیانی pET۳۲a و انتقال آن در باکتری E.coli BL۲۱ صورت گرفت. پس از بیان ژن در میزبان با استفاده از IPTG، پروتئین حاصل با استفاده از ستون های IMAC خالص سازی گردید . برای تعیین کیفی فعالیت، آنزیم نوترکیب در واکنش LAMP به کار گرفته شد. نتایج نشان می دهد آنزیم Bst Polymerase می تواند جایگزین مناسبی برای نوع وارداتی آن باشد. کلمات کلیدی: Bst DNA polymerase ، همسانه سازی، بیان ژن، LAMP, PCR
Keywords:
Authors
زهرا امامی
گروه بیوتکنولوژی، دانشکده علوم زیستی ،دانشگاه الزهراس،تهران ،ایران
سارا غروی
گروه بیوتکنولوژی- دانشکده علوم زیستی- دانشگاه الزهرا- تهران- ایران
عزت عسگرانی
گروه بیوتکنولوژی- دانشکده علوم زیستی- دانشگاه الزهرا- تهران- ایران
مراجع و منابع این Paper:
لیست زیر مراجع و منابع استفاده شده در این Paper را نمایش می دهد. این مراجع به صورت کاملا ماشینی و بر اساس هوش مصنوعی استخراج شده اند و لذا ممکن است دارای اشکالاتی باشند که به مرور زمان دقت استخراج این محتوا افزایش می یابد. مراجعی که مقالات مربوط به آنها در سیویلیکا نمایه شده و پیدا شده اند، به خود Paper لینک شده اند :