تشخیص مولکولی گونه های سارکوسیست در گوسفندان کشتارشده در کشتارگاه تبریز بروش SSCP-PCR

گونه های سارکوسیست انگلهای تک یاخته ای تشکیل دهنده کیست در عضلات حیوانات اهلی در سراسر جهان هستند. در این میان برخی گونه ها دارای اهمیت زئونوتیک نیز هستند. تاکنون در گوسفند ۴ گونه سارکوسیست شناسایی شده که کیستهای ماکروسکوپی و میکروسکوپی در عضلات گوسفند تشکیل میدهند. تشکیل کیستهای ماکروسکوپیک از نظر حذف قسمتهای آلوده لاشه منجر به ضرر اقتصادی شده و در مورد گونه های تشکیل دهنده کیستهای میکروسکوپیک، بیماریزایی آنها به صورت سقط جنین و تلفات در گله حائز اهمیت است. از آنجایی که گونه های گزارش شده در گوسفند بیماریزایی متفاوتی دارند و با توجه به راه انتقال انگل به انسان، که در اثر خوردن گوشتهای خام یا کم پخته آلوده میباشد، در کشورهای مختلف و ایران لزوم توجه بیشتر به کنترل بیماری و پژوهش در جنبه های مختلف آن احساس میشود. در این بررسی به تشخیص گونه های مختلف این تک یاخته در گوسفند به روش مولکولی پرداخته شد. در این مطالعه که طی دوره زمانی پاییز و زمستان ۱۳۹۴ تا بهار ۱۳۹۵ انجام شد، تعداد ۳۰ نمونه از عضلات بین دنده ای، دیافراگم و مری گوسفندان کشتار شده از کشتارگاه تبریز اخذ گردیده و با استفاده از روشهای ماکروسکوپیک و میکروسکوپیک - روش داب اسمیر و هضمی و رنگ آمیزی گیمسا- از لحاظ وجود زوئیتهای انگل سارکوسیست مورد بررسی قرار گرفت و تمامی نمونه ها مثبت گزارش شدند. سپس دو گونه سارکوسیستیس تنلا و سارکوسیستیس ژیگانته آ با پرایمرهای اختصاصی با روش PCR تکثیر شده و محصولات PCR بر روی ژل پلی اکریلامید % ۱۰ با روش (SSCP) منتقل شد و الگوهای ژنوتیپی ژن تکثیر شده تنلا و ژیگانته آ مورد بررسی قرارگرفت. در تمامی نمونه های مورد بررسی آلودگی توام به دو گونه تنلا و ژیگانته آ مشاهده گردید. نتایج حاصل از این مطالعه برای اولین بار نشان داد که در داخل گونه های تنلا و ژیگانته آ چند شکلی وجود دارد. تا جایی که پنج نوع الگوی ژنوتیپی متفاوت برای ژیگانته آ و دو نوع الگوی ژنوتیپی متفاوت برای تنلا مشاهده شد.

Keywords:

سارکوسیستیس تنلا , سارکوسیستیس ژیگانتهآ- مولکولی- SSCP-PCR