بررسی تنوع ژنتیکی ژن گیرنده MC۴R در بلدرچین ژاپنی

هدف از پژوهش حاضر، بررسی تنوع ژنی در جایگاه ژنتیکی MC۴R به وسیله روشPCR-SSCPدر بلدرچین ژاپنی بود. برای این منظور از ۱۷۰ قطعه بلدرچین ژاپنی، خون گیری انجام شد. برای خونگیری از ونوجکتهای حاوی EDTA برای جلوگیری از انعقاد خون، استفاده شد. بعد از خون گیری، نمونه ها به آزمایشگاه گروه علوم دامی انتقال یافت و تا استخراج DNA، در دمای ۲۰- درجه نگهداری شد. استخراج DNA با استفاده از روش بهینه یافته نمکی صورت گرفت. کمیت و کیفیت DNA استخراجی به وسیله اسپکتوفتومتری و ژل آگارز یک درصد تعیین شد. برای انجام واکنش زنجیره ای پلیمراز ابتدا طراحی پرایمرهای اختصاصی جهت تکثیر قطعه ۲۵۰ جفت بازی ژن MC۴R با استفاده از نرم افزار Primer۳Plus انجام گرفت. قطعه مورد نظر به خوبی تکثیر یافت. روش تفاوت فرم فضایی رشته های منفرد (SSCP) جهت شناسایی چندشکلی در نمونه ها مورد استفاده قرار گرفت. الکتروفورز عمودی نمونه ها روی ژل پلی اکریل آمید ۱۲٪ به مدت ۱۲ ساعت با ولتاژ ۱۸۰ در دمای ۴ درجه سانتیگراد انجام گرفت. برای رنگ آمیزی ژل پلی آکریل آمید از نیترات نقره استفاده شد. نوارهای تشکیل شده بر روی ژل پلی اکریل آمید شکل یکسان را نشان دادند و حاکی از مونومورف بودن این جایگاه از ژن MC۴R بود.

Keywords:

پلی مورفیسم , ژن MC۴R , بلدرچین , PCR-SSCP