جداسازی و کشت اولیه سلولهای ستیغ عصبی از لوله عصبی جنین جوجه

هدف:  هدف از این مطالعه ارائه یک روش ساده و کارآمد جهت جداسازی و تعیین خصوصیت سلولهای ستیغ عصبی از بافت لوله عصبی میباشد. مواد و روشها: تخم مرغهای نطفهدار حدود ۳۵ ساعت در دمای ۳۸ درجه سانتیگراد و رطوبت نسبی ۵۵ تا ۶۰ درصد در داخل انکوباتور قرار داده شدند تا جنینها بهمراحل ۱۰-۱۲ طبق جدول تکاملی هامبورگر-هامیلتون رسیدند. سپس جنینها از روی سطح زرده تخم مرغ جداسازی شده  و لوله عصبی از جنین جوجه جدا و بهمدت ۲۴ ساعت در ظروف کشت سلولی، کشت داده شد تا سلولهای ستیغ عصبی از آن جدا شوند. آنگاه لوله عصبی از کف ظروف کشت جدا و خارج شد و به سلولها بهمدت ۵ روز اجازه تکثیر و ازدیاد داده شد. در نهایت این سلولها جمعآوری شدند و جهت ارزیابی پروفایل بیان ژن، PCR صورت گرفت. نتایج: سلولهای ستیغ عصبی از لوله عصبی جدا شده و در شرایط کشت گسترش یافتند. این سلولها همچنین نشانگرهای Slug، Sox۹ و Sox۱۰ را بهروش RT-PCR بیان کردند. نتیجهگیری: سلولهای ستیغ عصبی میتوانند در محیط آزمایشگاهی از لوله عصبی رها شده و در شرایط کشت مناسب و ساده تکثیر و گسترش یابند.  

Keywords:

جنین جوجه , سلول ستیغ عصبی , لوله عصبی