کلونینگ و بیان ژن آنزیم فیتاز در باکتری اشرشیا اکلی جهت بازیابی آنزیم در شرایط آزمایشگاهی
Publish Year: 1400
نوع سند: مقاله ژورنالی
زبان: Persian
View: 349
This Paper With 8 Page And PDF Format Ready To Download
- Certificate
- من نویسنده این مقاله هستم
استخراج به نرم افزارهای پژوهشی:
شناسه ملی سند علمی:
JR_NUMS-9-2_010
تاریخ نمایه سازی: 12 مرداد 1400
Abstract:
مقدمه
پروتئین فیتاز آنزیمی است که توانایی تجزیه ی فیتیک اسید به میواینوزیتول و فسفات معدنی را دارا می باشد و از این آنزیم به صورت گسترده ای به عنوان یک افزودنی در غذای حیوانات استفاده می شود. هدف از این مطالعه دستیابی به تولید میزان بالایی از آنزیم فیتاز باکتریایی در وکتور بیانی PET۲۶b در میزبان باکتریایی بود.
مواد و روشها
جهت تولید آنزیم فیتاز نوترکیب، ژن هدف به وکتور بیانی pET-۲۶b- وارد شد و وکتور نوترکیب پس از تکثیر در باکتری اشریشیاکلی DH۵α به باکتری اشریشیاکلی BL۲۱ به عنوان میزبان بیان منتقل شد. برای جداسازی فیتاز نوترکیب از روش SDS-PAGE استفاده گردید و میزان تولید پروتئین نوترکیب با استفاده از الکتروفورز بررسی شد.
یافتهها
آنزیم فیتاز باکتریایی با موفقیت در باکتری اشریشیاکلی بیان شد و وزن مولکولی فیتاز نوترکیب تولید شده در حدود ۸۵ کیلو دالتون تخمین زده شد. همچنین pH بهینه برای فعالیت آنزیم فیتاز باکتریایی نوترکیب در حدود ۵/۵ برآورد شد.
نتیجهگیری
نتایج بدست آمده نشان دهنده موفقیت در تولید آنزیم فیتاز در شرایط آزمایشگاهی با استفاده از میزبان BL۲۱ با کمترین هزینه ممکن جهت استفاده در صنعت خوراکی طیور است.
Keywords:
Authors
مریم آزادی
Department of Biochemistry Tehran University of Medical Sciences, Islamic Azad University, Tehran, Iran
لیلا پیشکار
Department of Biology, Islamshahr Branch, Islamic Azad University, Islamshahr, Iran
احسان دهنوی
Pharmaceutical Technology Development Center of Shahid Beheshti University of Medical Sciences, Tehran, Iran
مراجع و منابع این Paper:
لیست زیر مراجع و منابع استفاده شده در این Paper را نمایش می دهد. این مراجع به صورت کاملا ماشینی و بر اساس هوش مصنوعی استخراج شده اند و لذا ممکن است دارای اشکالاتی باشند که به مرور زمان دقت استخراج این محتوا افزایش می یابد. مراجعی که مقالات مربوط به آنها در سیویلیکا نمایه شده و پیدا شده اند، به خود Paper لینک شده اند :