تشخیص مولکولی تریکوموناس گالینه با استفاده از تکثیر ژن rRNA ۵.۸S به روش PCR در کبوتران خانواده کلمبیده (Columbidae)

تریکوموناس گالینه تک یاخته تاژکداری است که عامل ایجاد تریکومونیازیس پرندگان می شود. این انگل گسترش جهانی دارد و آلودگی در اکثر پرندگان بدون علامت است. درحال حاضر تشخیص ارگانیسم با استفاده از روش های آزمایشگاهی شامل گسترش مرطوب، کشت و روش های مولکولی است. در این مطالعه بر آن شدیم تا با استفاده از روش مولکولی (Polymerase Chain Reaction(PCR و بر اساس تکثیر ژن ۵.۸S rRNA تریکوموناس گالینه، آلودگی کبوتران را مورد بررسی قرار داده و نتایج آن را با روش گسترش مرطوب مقایسه کنیم. نمونه ها از ۷۲ قطعه کبوتر خانواده کلمبیده که شامل ۲ قطعه قمری خانگی، ۸ قطعه کبوتر چاهی و ۶۲ قطعه کبوتر اهلی با استفاده سوآپ استریل از محوطه ی دهانی و چینه دان گرفته شد و هر نمونه به دو قسمت تقسیم شد. یک قسمت آن فورا با آزمایش گسترش مرطوب و در زیر میکروسکوپ نوری مورد مطالعه قرار گرفت که به طور کلی ۱۸ نمونه با این روش مثبت تشخیص داده شدند. قسمت دیگر نمونه به منظور انجام واکنش PCRاختصاصی با استفاده از یک جفت پرایمر از ناحیه حفاظت شده ژن ریبوزومی ۵.۸S تریکوموناس گالینه مورد استفاده قرار گرفت که ۲۴ نمونه با این روش مثبت تشخیص داده شد. با توجه به نتایج مولکولی به دست آمده با استفاده از پرایمرهای Trich-۱Fو Trich-۱R اندازه باندهای حاصل از PCR کبوتران خانواده کلمبیده، ۳۹۰ جفت باز مشاهده گردید. همچنین می توان گفت که تست PCR حساسیت و اختصاصیت بالاتری نسبت به آزمایش گسترش مرطوب دارد.

Keywords:

PCR , تریکوموناس گالینه , ژن ?.?SrRNA , کبوتران خانواده کلمبیده , تشخیص مولکولی