تایپینگ سوش های مایکو باکتریوم توبر کلوزیس جدا شده در بیماران شهر تهران با استفاده از Spoligotyping

Publish Year: 1390
نوع سند: مقاله ژورنالی
زبان: Persian
View: 99

نسخه کامل این Paper ارائه نشده است و در دسترس نمی باشد

  • Certificate
  • من نویسنده این مقاله هستم

استخراج به نرم افزارهای پژوهشی:

لینک ثابت به این Paper:

شناسه ملی سند علمی:

JR_NCMBJ-1-2_007

تاریخ نمایه سازی: 20 اسفند 1400

Abstract:

Normal ۰ false false false EN-US X-NONE AR-SA /* Style Definitions */ table.MsoNormalTable {mso-style-name:"Table Normal" mso-tstyle-rowband-size:۰ mso-tstyle-colband-size:۰ mso-style-noshow:yes mso-style-priority:۹۹ mso-style-qformat:yes mso-style-parent:"" mso-padding-alt:۰in ۵.۴pt ۰in ۵.۴pt mso-para-margin-top:۰in mso-para-margin-right:۰in mso-para-margin-bottom:۱۰.۰pt mso-para-margin-left:۰in line-height:۱۱۵% mso-pagination:widow-orphan font-size:۱۱.۰pt font-family:"Calibri","sans-serif" mso-ascii-font-family:Calibri mso-ascii-theme-font:minor-latin mso-fareast-font-family:"Times New Roman" mso-fareast-theme-font:minor-fareast mso-hansi-font-family:Calibri mso-hansi-theme-font:minor-latin mso-bidi-font-family:Arial mso-bidi-theme-font:minor-bidi} سابقه و هدف: اسپولیگو تایپینگ روشی بر اساس پلی مورفیسم لوکوس کروموزی DR (توالی تکراری مستقیم) ۳۶جفت بازی که به یک یا دو توالی فاصله اندازه ۳۵-۴۱ جفت بازی متصل است می باشد.۹۴ توالی فاصله اندازه مختلف بین DR شناسایی شده که تنها ۴۳ توالی فاصله انداز به صورت معمول مورد استفاده قرار می گیرد. بر اساس وجود یا فقدان این توالی ها می توان سوش های مایکو باکتریوم توبرکلوزیس را از هم متمایز کرد. هدف از انجام مطاله شناسایی تایپ های منتشر سوش مایکوباکترم توبرکلوزیس در شهر تهران می باشد. مواد و روش ها: کشت مثبت متعلق به ۱۴۹ بیمار مبتلا به سل ریوی از نظر اسپولیگوتایپینگ مورد بررسی قرار گرفتند. جدا سازی اولیه سویه های مایکوباکتریوم با روش پتروف ۴% و با استفاده از محیط Lowenstein Jensen انجام شد و برای شناسایی سویه ها از تست بیوشیمیایی افتراقی از قبیل: تست های نیاسین- فعالیت کاتالاز- احیاء نیترات استفاده شد. حساسیت دارویی در برابر ایزونیازید (۰/۲µg/m)، ریفامپین (۴۰µg/ml). استرپتوماسیون (µg/m ۱۰) و اتامبوتول (۲µg/ml) به روش تناسبی انجام و سویه ها به سه گروه حساس، MDR و غیر MDR تقسیم بندی شده اند. سپس DNA از کلنی ها مثبت با روش کیت DNA technology استخراج گردید. قطعات مورد نظر با روش PCR تکثیر شده و پس از دناتوره کردن قطعه تکثیرشده هیبریداسیون با آنزیم استرپتاویدین پر اکسید از به روش line reverse blot انجام می گیرد. پس از اضافه کردن کمی لومینسانس و گذاشتن غشاء بر روی فیلم X-ray رادیولوژی می شود که به روش کیت Spoligotyping از شرکت هلندی انجام شد. یافته ها: سویه ها به ۹ دسته (Beijing ,CAS۱ ,CAS۲ ,Haarlem ,U ,T۲ ,T۱ ,EAI۳ ,EAI۲ ,CAS۲) متمایز شدند که بیشترین تعداد مربوط به سویه T-Haarlem (۲۷٪) و کمترین تعداد مربوط به سویه (T۲ (٪۰/۴ می باشد. همچنین با روش تایپینگ دو سویه متعلق به مایکوباکتریوم بویس نیز شناسایی شد.نتیجه گیری: این روش سریع ساده و دارای حساسیت بالا بود و در هربار انجام این روش تعداد ۵۰ نمونه را می توان ازهم متمایز کرد. 

Authors

سعید ذاکر بستان آباد

Islamic Azad University Parand branch, Science Faculty, Biology Department

اسماعیل جبارزاده

Pasteur Institute of Iran, Mycobacteriology Department

شاهین پور آذر

Massoud Laboratory Complex, Mycobacteriology Lab.

مصطفی قلمی

Massoud Laboratory Complex, Mycobacteriology Lab.