افزایش حساسیت کیت الایزای گلیکوپروتئین مرتبط با آبستنی به منظور تشخیص سریع تر آبستنی در گاو شیری

تشخیص سریع آبستنی یکی از فاکتورهای کلیدی موثر در افزایش بازدهی تولید­مثل در گاوهای شیری است. گلیکوپروتئین­های مرتبط با آبستنی توسط جفت گاوهای آبستن تولید و تراوش می­شوند و در سال­های اخیر در تشخیص آبستنی گاو مورداستفاده قرارگرفته اند. با توجه به محدود شدن روش سونوگرافی و سایر روش­های مورداستفاده به حدود روز ۳۰ پس از تلقیح، هدف از این پژوهش کاهش زمان تشخیص آبستنی با استفاده از نانو­کیت تشخیص گلیکوپروتئین مرتبط با آبستنی بود. برای این منظور، یک نانو­کیت الایزای ساندویچی برای تشخیص گلیکوپروتئین­های مرتبط با آبستنی طراحی و ساخته شد. نانوذرات مگنت به منظور افزایش سطح تماس بین آنتی­بادی و آنتی­ژن مورداستفاده قرار گرفت و از ویژگی میل اتصال­پذیری بالا بین استرپتاویدین و بیوتین برای اتصال آنتی­بادی به نانوذرات استفاده شد. در این پژوهش تعداد ۵۸ گاو شیری نژاد هلشتاین انتخاب و تکنیک همزمان­سازی و تلقیح مصنوعی انجام شد. نمونه­های خون گاوها از روز ۱۸ تا ۳۰ پس از تلقیح روزانه جمع­آوری و پس از انتقال به آزمایشگاه نمونه­های پلاسمای خون جداسازی شد و وضعیت آبستنی در روز ۳۰ و ۶۰ آبستنی به ترتیب با استفاده از سونوگرافی و لمس راست روده بررسی شد. غلظت گلیکوپروتئین­های مرتبط با آبستنی در نمونه­های پلاسما با استفاده از نانوکیت اندازه­گیری و با استفاده از نرم افزار SAS آنالیز شد. نتایج نشان داد، غلظت گلیکوپروتئین­ها از روز ۲۱ تا ۳۰ پس از تلقیح به صورت وابسته به روز در گاوهای آبستن افزایش می­یابد. همچنین اولین افزایش چشمگیر در غلظت گلیکوپروتئین­ها در روز ۲۳ پس از تلقیح مشاهده شد و گاوهایی که تا روز ۶۰ پس از تلقیح آبستن تشخیص داده شدند، در روز ۲۴ پس از تلقیح غلظت گلیکوپروتئین بیشتری در مقایسه با گاوهای غیرآبستن داشتند (به ترتیب ng/ml ۱۵/۰±۲۸/۲ و ۱۸/۰±۷/۰) .بر اساس این نتایج، غلظت گلیکوپروتئین در روز ۲۴ آبستنی می­تواند نشانه­ای زودهنگام از وضعیت آبستنی در گاوهای شیری باشد. بااین حال، مطالعات بیشتری لازم است تا کارایی این روش تایید شود.

Keywords:

آبستنی , سقط جنین , گاو شیری , گلیکوپروتئین , نانوکیت