تولید سلول های بنیادی رویانی با استفاده از رویان های شبیه سازی شده در گاومیش

سلول های بنیادی رویانی از لایه زاینده داخلی رویان در مرحله بلاستوسیست تولید می شوند و توانایی تمایز به تمام سلول های لایه زاینده رویان را دارند. در این تحقیق سلول های بنیادی رویانی از بلاستوسیست های حاصل از شبیه سازی به روش Hand Made Cloning (HMC) تولید شدند و کارایی آنها با سلول های بنیادی رویانی حاصل از لقاح آزمایشگاهی مقایسه گردید. برای کشت سلول های بنیادی از لایه تغدیه کننده بعلاوه محیط کشت حاوی Knockout-Dulbeccoʾs Modified Eagle's Medium (Ko-DMEM)، Knockout Serum Replacement(KSR)، Leukemia Inhibitory Factor (LIF)، Basic Fibroblast Growth Factor-۲ (FGF-۲)، ال- گلوتامین، اسیدهای آمینه غیر ضروری و جنتامایسین استفاده شد. جهت شناسایی سلول های بنیادی از شناساگرهای سطح سلولی SSEA-۱، SSEA-۴، TRA-۱-۶۰ و TRA-۱-۸۱ و پرتوانی OCT۳/۴، SOX۲ وNANOG استفاده گردید. نتایج نشان دادند، که نرخ رشد سلول های بنیادی حاصل از لقاح آزمایشگاهی بطور معنی داری بیشتر از سلول های بنیادی حاصل از شبیه سازی بود (به ترتیب ۱۲۰ درصد در مقایسه با ۶۵ درصد). با این وجود، نتایج حاصل از بررسی بیان ژن نشان داد، اختلاف معنی داری در بیان ژنهای OCT۳/۴، SOX۲ و C-MYC بین سلول های بنیادی حاصل از شبیه سازی و لقاح آزمایشگاهی مشاهده نگردید، تنها اختلاف مشاهده شده مربوط به بیان ژن NANOG است، که در سلول های بنیادی حاصل از شبیه سازی بطور معنی داری افزایش یافت. سلول های بنیادی حاصل از هر دو منشاء قابلیت پرتوانی خود را برای بیش از دو سال حفظ کردند و به سلول های مختلف از جمله سلول های عصبی، پوششی، چربی و عضلانی تمایز یافتند.

تولید سلول های بنیادی رویانی با استفاده از رویان های شبیه سازی شده در گاومیش Keywords:

سلول های بنیادی رویانی , شبیه سازی , لقاح آزمایشگاهی , گاومیش