سیویلیکا را در شبکه های اجتماعی دنبال نمایید.

Login
PapersConferencesJournals

پارامترهای فیزیکی و بیولوژیکی موثر در ایجاد گیاهان ترانسپلاستوم توتون به روش بمباران ذره ای توسط PDS-۱۰۰۰/He

Publish place: Journal Of Genetic Engineering and Biosafety، Vol: 10، Issue: 2
Publish Year: 1400
Type: Journal paper
Language: Persian
View: 225

This Paper With 16 Page And PDF Format Ready To Download

DOWNLOAD Paper

Export:

Link to this Paper:
https://civilica.com/doc/1459783

Document National Code:

JR_GEB-10-2_006

Index date: 7 June 2022

پارامترهای فیزیکی و بیولوژیکی موثر در ایجاد گیاهان ترانسپلاستوم توتون به روش بمباران ذره ای توسط PDS-۱۰۰۰/He abstract

بهینه سازی پارامترهای موثر در روش بمباران ذره ای برای انتقال DNA به کلروپلاست با کارایی بالا و بدون آسیب به بافت یک نیاز ضروری در ایجاد گیاهان ترانسپلاستوم می باشد. با توجه به تشابه نسبی موانع فیزیکی بر سر راه ورود ریزذرات به هسته و کلروپلاست معمولا از ژن گزارشگر هسته ای gus استفاده می شود، ولی پارامترهای فیزیکی و بیولوژیکی درگیر در تراریختی پلاست ها بطور مستقیم گزارش نشده اند. در این تحقیق برای بهینه سازی انتقال ژن به کلروپلاست توتون پارامترهای نوع ریزذرات، غلظت DNA، فشار هلیوم شتاب دهنده، آرایش برگ، فاصله شلیک و مدت زمان پیش تیمار ریزنمونه ها قبل از بمباران بررسی شد. پس از انتقال ناقل کلروپلاستی به ریزنمونه های برگی، باززایی گیاهان ترانسپلاستوم در محیط گزینش حاوی mg/l ۵۰۰ اسپکتینومایسین انجام شد. بیشترین تعداد ترانسپلاستوم (۲.۵ گیاه به ازای هر بمباران) از واحد آزمایشی شلیک شده با ریزذرات تنگستن با قطر μm ۰.۷، مقدار DNA μg ۱، فشار هلیوم شتاب دهنده psi ۱۱۰۰، فاصله شلیک ۶ سانتی متر و دوره پیش تیمار ۲۴ ساعت حاصل شد، و این پارامترها به عنوان دستورالعمل کارآمد تراریختی کلروپلاستی معرفی می شود. گیاهان هموپلاسم پس از سه دوره باززایی در حضور آنتی بیوتیک های استرپتو/اسپکتینومایسین بدست آمدند. تایید مولکولی درج کاست بیانی در محل دقیق ژنوم و تایید هموپلاسمی با استفاده از آنالیز PCR و لکه گذاری سادرن انجام شد. گیاهچه های سبز و آلبینوی حاصل از جوانه زنی بذور تولید شده از تلاقی متقابل بین گیاهان توتون شاهد و ترانسپلاستوم، توارث مادری ژن های انتقالی به کلروپلاست را تائید کرد.

پارامترهای فیزیکی و بیولوژیکی موثر در ایجاد گیاهان ترانسپلاستوم توتون به روش بمباران ذره ای توسط PDS-۱۰۰۰/He Keywords:

پارامترهای فیزیکی و بیولوژیکی موثر در ایجاد گیاهان ترانسپلاستوم توتون به روش بمباران ذره ای توسط PDS-۱۰۰۰/He authors

مریم احساسات وطن

Department of Plant Breeding & Biotechnology, Faculty of Agriculture, University of Tabriz

بهرام باغبان کهنه روز

Department of Plant Breeding & Biotechnology, Faculty of Agriculture, University of Tabriz, Iran

اشرف قلی زاده

Department of Animal Biology, Faculty of Natural Science, University of Tabriz

حمیده افقی

Department of Biotechnology, Iranian Research Organization for Science and Technology (IROST), Tehran

داریوش شانه بندی

Immunology Research Center, Tabriz University of Medical Sciences