اثر اگزامات بر فعالیت آنزیم LDH-C۴ اسپرم در موش صحرایی

زمینه و هدف: LDH-C۴  به عنوان یکی از ایزوآنزیم های لاکتات دهیدروژناز، در بیضه ی بالغ و اسپرماتوزوییدهای بسیاری از گونه ها مشاهده شده است. عملکرد فیزیولوژیک این ایزوآنزیم نشان دهنده ی نقش آن در ایجاد انرژی جهت تحرک و بقای اسپرم می باشد. در این مطالعه، اثر اگزامات به عنوان مهارکننده ی اختصاصی ایزوآنزیم ۴C-LDH به صورت In Vivo در موش صحرایی مورد بررسی قرار گرفت. روش بررسی: ابتدا ۲۰ سر موش صحرایی بالغ به چهار گروه مساوی تقسیم گردید. یک گروه به عنوان گروه کنترل فقط سالین دریافت کردند؛ و به سه گروه دیگر مقادیر مختلف اگزامات (۶۰۰، ۳۰۰، ۱۵۰ میلی گرم بر کیلوگرم) روزانه به مدت ۴۵ روز به روش داخل صفاقی تزریق شد. در ادامه موش ها را با استفاده از کلروفرم کشته و دم اپی دیدیم آن ها جدا گردید. سپس در دم اپی دیدیم چند برش ایجاد نموده و جهت خروج اسپرم قطعات اپی دیدیم در محیط کشت T۶ در دمای ۳۷ درجه ی سانتی گراد و CO ۲ ۵% به مدت یک ساعت قرار داده شد، استخراج آنزیمLDH-C۴  بر اساس روش اروین گلدبرگ انجام گرفت، و مقدار پروتئین با روش لوری اندازه گیری شد. عمل خالص سازی نسبی طی ۲ مرحله شامل رسوب دادن آنزیم به کمک سولفات آمونیوم و کروماتوگرافی روی ستون حاوی DEAE-SEPHADEX-A۵۰ صورت گرفت. در تمام مراحل استخراج، مقدار پروتئین و فعالیت آنزیمLDH  توتال در گروه های دریافت کننده ی دارو مشخص شده، و سپس با گروه کنترل مقایسه گردید. یافته ها: در این مطالعه فعالیت کل آنزیم LDH-C۴ در گروه کنترل Unit۳/۰±۸/۱۱ و در گروه های دریافت کننده ی اگزامات به ترتیب با افزایش غلظت اگزامات (۱۵۰، ۳۰۰ و ۶۰۰ میلی گرم بر کیلوگرم)، ۳/۰±۳/۸، ۲/۰±۹/۶ و ۱/۰±۲/۳ واحد(Unit)  مشاهده شد. هم چنین در غلظت ۶۰۰ میلی گرم بر کیلوگرم اگزامات، فعالیت آنزیم در حدود ۶۳% نسبت به گروه کنترل مهار گردید. نتیجه گیری: این پژوهش نشان داد که اگزامات به طریقIn vivo  فعالیت آنزیم LDH-C۴ را کاهش می دهد و این تاثیر با افزایش غلظت متناسب می باشد. لذا با توجه به اثر بازدارنده ی رقابتی اگزامات بر LDH-C۴ این ماده می تواند به عنوان ماده ی ضد بارداری در مردان مورد استفاده قرار گیرد.

Keywords:

LDH-C۴ , Oamate , Sperm , Rat , لاکتات دهیدروژنز c۴ , اگزامات , اسپرم , موش