بررسی بیان پروتئین سیکلواکسیژناز-۲ در سرطان معده القایی به وسیله هلیکوباکتر پیلوری در موش صحرایی

زمینه و هدف: سرطان معده یکی از مهم ترین سرطان های رایج معده- روده ای است که میزان مرگ و میر ناشی از آن در جهان رو به افزایش است. هلیکوباکتر پیلوری (H. Pylori)، عامل اصلی گاستریت و زخم معده می باشد. سیکلواکسیژناز (COX) آنزیم اصلی در بیوسنتز مسیر پروستاگلاندین ها به شمار می رود. مطالعات آزمایشگاهی نشان داده است که در سرطان کولون و دیگر سرطان ها میزان COX-۲ بیش از حد بیان می شود. به منظور تایید این یافته ها در سرطان معده، در این تحقیق یافته های ایمونوهیستوشیمیایی مخاط معده در یک الگوی حیوانی سرطان معده القا شده توسط هلیکوباکتر پیلوری در موش صحرایی (Sprague Dawly) بررسی گردید. روش بررسی: در این مطالعه موش ها در سه گروه ۵ تایی به طور تصادفی تقسیم شدند. موش های صحرایی گروه ۱ به عنوان گروه کنترل (گروهی که MNU و هلیکوباکتر پیلوری دریافت نکردند)، انتخاب شدند. موش های صحرایی گروه ۲، MNU را دریافت کردند. در موش های صحرایی گروه ۳ نیز همین دستورالعمل رعایت شد و یک هفته بعد، سه دفعه در روز و به صورت یک روز در میان، هلیکوباکتر پیلوری گاواژ گردید. موش های گروه های کنترل، آزمایش ۱ و ۲ در طی دوره آزمایش به صورت استاندارد تغذیه شدند. بعد از گذشت ۲۰ هفته موش ها تحت شرایط بیهوشی وزن شدند و از نصف بافت معده نمونه گیری انجام شد. نمونه های معده به ۶ قطعه کوچکتر تقسیم شدند، سپس در فرمالین ۱۰% فیکس و به روش استاندارد آماده شده و در پارافین قالب گیری شدند. در ادامه، برش های ۶ میکرومتری از آنها تهیه و توسط رنگ آمیزی H&E بررسی گردید. آزمایشات ایمنوهیستوشیمیایی توسط رنگ آمیزی COX-۲ نیز صورت گرفت. برای تایید عفونت هلیکوباکتر پیلوری mm ۳ از مخاط معده به محیط بروسلا آگار انتقال داده شد. سپس کلنی های اثریافته پس از مدت ۵-۳ روز توسط رنگ آمیزی گرم، تست کاتالاز و اکسیداز و مورفولوژی بررسی شدند. همچنین mm۳ از نمونه معده توسط کیت سریع اوره بررسی گردید. یافته ها: در این مطالعه، وزن حیوانات گروه های آزمایشی در مقایسه با گروه کنترل کاهش معنی داری یافت. مطالعات هیستوپاتولوژی در گروه آزمایش ۱ و ۲ نشان داد که اینفیلتریشن شدید سلول های پلی مورفونوکلئر و مونونوکلئر در لایه لامیناپروپریا و زیر مخاط آنتروم، تکثیر سلول های اپی تلیوم معده، همچنین اینفیلتراسیون ازوفاژیال روی داده است. همچنین در گروه کنترل تغییرات غیرطبیعی مشاهده نشد. در مطالعات ایمونوهیستوشیمی، پروتئین COX-۲ در معده گروه های آزمایش مشاهده گردید، اما در گروه کنترل دیده نشد. نتیجه گیری: نتایج این مطالعه نشان داد هلیکوباکتر پیلوری باعث کاهش معنی داری در وزن حیوانات شده است. همچنین مطالعات هیستوپاتولوژی، متاپلازیای ازوفاژیال در معده موش های صحرایی را نشان داد. در مطالعات ایمونوهیستوشیمیایی نیز مشخص گردید که پروتئین در طی مراحل اولیه متاپلازیا بیان می گردد.

Keywords:

Gastric Cancer , Helicobacter Pylori , Cyclooxygenase-۲. , سرطان معده , هلیکوباکتر پیلوری , سیکلواکسیژناز- ۲.