اثر سویه های اگروباکتریوم رایزوژنز بر القای ریشه مویین در ریزنمونه های مختلف گیاه یونجه

مقدمه: تراریخت سازی میانجی گری شده توسط آگروباکتریوم، یک فن آوری کارآمد برای القای ریشه های مویین می باشد. در پژوهش حاضر، اثر سویه اگروباکتریوم رایزوژنز و نوع ریزنمونه بر القای ریشه مویین در گیاه یونجه بررسی گردید. روش ها: آزمایش به صورت فاکتوریل در قالب طرح کاملا تصادفی با سه تکرار در دانشگاه آزاد اسلامی واحد سبزوار انجام شد. فاکتورهای آزمایشی شامل سویه اگروباکتریوم رایزوژنز در چهار سطح A۱۳، ۳۱۸، ۱۵۸۳۴و A۴ و نوع ریزنمونه در دو سطح ریزنمونه برگ و هیپوکوتیل بودند. نتایج و بحث: بیشترین درصد القای ریشه مویین، در ریزنمونه های برگ تلقیح شده با سویه باکتریایی A۴ به دست آمد که به طور معنی داری بیشتر از سایر سویه های اگروباکتریوم رایزوژنز بود. تلقیح با سویه باکتریایی ۳۱۸، باعث کمترین القای ریشه مویین در ریزنمونه های برگ و هیپوکوتیل گردید. سویه های باکتریایی A۱۳ و ۱۵۸۳۴ به ترتیب بیشترین تعداد ریشه مویین در ریزنمونه های برگ و هیپوکوتیل را تولید نمودند. کمترین تعداد ریشه مویین در ریزنمونه های برگ نیز در شرایط تلقیح با سویه ۳۱۸ تولید گردید. بیشترین و کمترین طول ریشه مویین در ریزنمونه های برگ، به ترتیب در شرایط تلقیح با سویه های باکتریایی A۴ و ۳۱۸ مشاهده شد. در ریزنمونه های هیپوکوتیل، تفاوت معنی داری بین سویه های مختلف اگروباکتریوم رایزوژنز در رابطه با تعداد و طول ریشه مویین وجود نداشت. نتایج حاصل از تفکیک محصولات واکنش PCR و آشکارسازی باندها، حضور ژن rolB در ژنوم سلول های ریشه های مویین را تایید نمود. با توجه به نتایج، استفاده از ریزنمونه برگ همراه با سویه A۴ اگروباکتریوم رایزوژنز جهت تولید ریشه-های مویین در گیاه یونجه قابل توصیه می باشد.

Keywords:

پلاسمید , تراریخت سازی , ریزنمونه , سویه باکتریایی , هیپوکوتیل