تاثیر عصاره گیاه کالیگونوم بر کلونی زایی و تولید گونه های فعال اکسیژن در سلول های بنیادی اسپرماتوگونی گوسفند

این مطالعه به منظور بررسی اثر عصاره کالیگونوم بر تعداد کلونی ها، تولید گونه های فعال اکسیژن و بیان ژن های مرتبط با آپوپتوزیس در سلول های بنیادی اسپرماتوگونی گوسفند انجام شد. در این پژوهش سلول های بنیادی اسپرماتوگونی موجود در غشاء پایه لوله های منی ساز از بیضه گوسفند نژاد افشاری با استفاده از مراحل هضم آنزیمی جداسازی شدند. نمونه ها به چهار گروه تقسیم شدند. گروه شاهد شامل محیط پایه بود و در سه گروه بعدی به ترتیب تیمارهای H۲O۲ (۳۰ میکرومولار)، کالیگونوم (۱۰ میکروگرم در میلی لیتر) و کالیگونوم+H۲O۲ (۳۰ میکرومولار H۲O۲ به همراه ۱۰ میکروگرم در میلی لیتر کالیگونوم) به محیط پایه اضافه شدند. سلول ها به مدت سه هفته کشت داده شدند و میزان کلونیزاسیون در روزهای پنج و ۱۴ و ۲۱ پس از شروع کشت ارزیابی شدند. پس از پایان دوره کشت میزان تولید گونه های فعال اکسیژن و بیان ژن های مرتبط با آپوپتوزیس (BAX و BCL۲) نیز ارزیابی شد. در روز ۵ و ۱۴ کشت، تعداد کلونی های اسپرماتوگونی در گروه های شاهد و کالیگونوم نسبت به دو گروه دیگر بیشتر بود (۰۵/۰≥P). در روز ۲۱ کشت، بیشترین و کمترین تعداد کلونی های اسپرماتوگونی به ترتیب در گروه های کالیگونوم و H۲O۲ مشاهده شد (۰۵/۰≥P). کمترین و بیشترین درصد سلول های اسپرماتوگونی حاوی ROS و همچنین بیان ژن BAX و مقدار نسبت BAX/BCL۲ به ترتیب در گروه های کالیگونوم و H۲O۲ مشاهده شد (۰۵/۰≥P). همچنین بیشترین مقدار بیان ژن BCL۲ در سلول های اسپرماتوگونی گروه کالیگونوم مشاهده شد (۰۵/۰≥P). در نتیجه استفاده از عصاره کالیگونوم در محیط کشت می تواند راهکاری تاثیرگذار در راستای بهبود کیفیت و کاهش بروز آپوپتوزیس در سلول های بنیادی اسپرماتوگونی گوسفند طی مطالعات تحقیقاتی باشد.

Keywords:

اسپرماتوگونی , کالیگونوم , کلونی زایی , گوسفند , Ros