تشخیص عوامل انتروویروسی در بیماران زیر ۱۵ سال مبتلا به فلج شل حاد در استان آذربایجان غربی

زمینه و هدف: درکشور ایران از آذرماه ۱۳۷۹ (دسامبر ۲۰۰۰ میلادی) تا کنون موردی از پولیوی وحشی مشاهده نشده واز سال ۲۰۰۰ نیز ایران بعنوان کشوری عاری از پولیوی وحشی (Polio free) توسط WHO معرفی شده است. اما به رغم حذف پولیوی وحشی، بدلیل بالا بودن حساسیت نظام مراقبت ، سالانه تعداد زیادی از موارد Acute Flaccid Paralysis (AFP) ردیابی شده است ، بطوریکه در سال ۱۳۸۲ تعداد موارد AFP(شامل سندرم گیلن باره) ردیابی شده، ۴۵۰ مورد بوده است. در این سال در استان آذربایجان غربی (که در حدود ۱۱۰۰۰۰۰ کودک زیر ۱۵ سال دارد و طبق انتظار باید در هر سال حدود ۱۱ مورد بیمار مبتلا به AFP در این استان مشاهده شود) موارد مشاهده شده به بیش از ۶ برابر موارد مورد انتظار یعنی ۷۰ نفر رسیده است. تعداد موارد AFP در کشور بعنوان یکی از مهمترین شاخص های ارزشیابی نظام مراقبت از پولیواهمیت زیادی دارد که میزان مورد انتظار قابل قبول توسط WHO یک مورد به ازای هر یکصد هزار نفر جمعیت زیر ۱۵ سال در نظر گرفته می شود. در این بررسی سعی شده است که عوامل انتروویروسی غیر پولیویی که در ایجاد موارد AFP در استان آذربایجان غربی نقش داشته اند مورد بررسی وردیابی قرار گیرد، لذا یکی از اهداف این پژوهش شناسایی هرچه بیشتر انتروویروس های غیر پولیویی در گردش ، در این استان با استفاده از سه رده سلولی RDوHep۲وL۲۰ و تکنیک مولکولی واکنش زنجیره ای پلی مراز_ رونویسی معکوس (Reverse Transcription-Polymerase Chain Reaction) بوده است.روش کار: تمام نمونه های مدفوع بیماران مبتلا به AFP آماده سازی شده و به ۳ رده سلولی RD,L۲۰,Hep۲ تزریق شدند. سروتیپ ویروس ها با روش تست خنثی سازی (Neutralization Test) مشخص گردید. در صورت جداسازی ویروس های پولیو، تشخیص افتراقی داخل تیپی (سوش واکسن و وحشی) با استفاده از تست های هیبریدیزاسیون و الیزا صورت گرفت و بالاخره در تمام نمونه ها تست RT-PCR با استفاده از پرایمر Pan-Ev انجام شد.نتایج: کشت سلولی توانست ۱۰ ویروس را جداسازی نماید که ۹ ویروس توسط رده سلولی RD جدا شد و لذا بعنوان حساسترین رده سلولی شناخته شد. تست مولکولی RT-PCR نیز ۱۶ مورد ویروس را ردیابی کرد که ۷ مورد مربوط به نمونه هایی بودند که بر روی RD جدا نشده بودند.RT-PCR توانست به میزان ۱۰% ردیابی ویروس را افزایش دهد که این امر نشان دهنده حساسیت بالای این روش می باشد. اگر چه استفاده از ترکیب دو روش کشت سلولی و RT-PCR جهت ردیابی و شناسایی انتروویروس های غیر پولیویی که در ایجاد AFP نقش دارند بسیار ارزشمند می باشد، اما بیش از ۷۵% از بیماران مبتلا بهAFP از لحاظ ابتلا به انتروویروس ها منفی بودند . نتیجه گیری: باید این بیماران از نظر عوامل دیگر ویروسی (فلاوی ویروس ها) و غیر ویروسی (کمپیلو باکتر ژژونی) مورد بررسی قرار گیرند

Keywords:

Enterovirus , Reverse Transcription-Polymerase Chain Reaction (RT-PCR) , انتروویروس , فلج شل حاد , کشت سلولی , واکنش زنجیره ای پلی مراز_ رونویسی معکوس