بررسی تاثیر ضد التهابی رزبنگال در ماکروفاژهای فعال شده با لیپو پلی ساکارید در غیاب نور

زمینه و هدف: رزبنگال یک رنگ گزانتینی آنیونی محلول در آب است که سابقه طولانی استفاده بیخطر از آن، نشاندهنده اثرات جانبی بسیار کم آن میباشد. با این حال تاکنون تاثیر ضد التهابی آن بررسی نشده است. مطالعه حاضر با هدف تعیین تاثیر رزبنگال بر پاسخ التهابی با واسطه تولید اکسید نیتریک و بیان آنزیم نیتریکاکساید سنتاز القایی (iNOS) در مدل ماکروفاژهای فعالشده با لیپوپلیساکارید (LPS) در تاریکی انجام شد. روش تحقیق: در این مطالعه تجربی، ماکروفاژهای رده J۷۷۴A.۱ از انستیتو پاستور خریداری و با غلظتهای متفاوت رزبنگال با یا بدون LPS در تاریکی تیمار شدند. تاثیر غلظتهای مختلف رزبنگال بر درصد زندهبودن ماکروفاژها با استفاده از آزمون ام.تی.تی (MTT) بررسی شد. به منظور تعیین میزان تولید اکسید نیتریک (بر حسب میکرومول) از روش رنگسنجی گریس و برای ارزیابی میزان بیان آنزیم نیتریکاکساید سنتاز القایی، از روش لکهگذاری وسترن استفاده شد. دادهها با استفاده از آزمون آماری تی در سطح معنیداری ۰۵/۰P< مورد تجزیه و تحلیل قرار گرفتند. یافته ها: طبق نتایج حاصل از آزمون MTT، درصد زندهبودن ماکروفاژهای تیمارشده با غلظتهای مختلف رزبنگال (۱، ۱۰، ۵۰، ۱۰۰، ۲۰۰ و ۳۰۰ میکرومول) به ترتیب ۶۶/۰±۹۹، ۲۰/۱±۹۷، ۸۸/۰±۹۰، ۵۷/۰±۸۸، ۸۸/۰±۸۱ و ۵۷/۰±۸۰ درصد بود. میزان تولید اکسید نیتریک (بر حسب میکرومول) توسط غلظتهای مختلف رزبنگال (۱، ۱۰، ۵۰، ۱۰۰، ۲۰۰ و ۳۰۰ میکرومول) به ترتیب ۱۷/۰±۱/۱۷، ۱۷/۰±۳/۱۴، ۰۹/۰±۱۶/۱۳، ۳۲/۰±۹/۸، ۰۹/۰±۱۶/۶ و صفر، و در گروه شاهد ۲۱/۰±۴/۲۱ میکرومول بود. غلظتهای مختلف رزبنگال سبب کاهش بیان آنزیم iNOS شدند. نتیجه گیری: نتایج حاصل از این مطالعه نشان داد که رزبنگال به طور وابسته به دوز، تولید اکسید نیتریک و نیز بیان آنزیم iNOS را در ماکروفاژهای التهابی کاهش میدهد؛ بدون این که بر درصد زنده بودن سلولها (در غلظتهای کمتر از ۲۰۰ میکرومول) تاثیر قابل توجهی داشته باشد؛ همچنین فرایند تاثیر ضد التهابی رزبنگال از طریق مهار بیان آنزیم iNOS نشان داده شد. این مطالعه رزبنگال را به عنوان یک ماده ضد التهابی بیخطر و جدید جهت بررسی در شرایط درونتنی معرفی مینماید.

Keywords:

Rose Bengal , J۷۷۴A.۱ macrophages , Inflammation , Nitric oxide , Inducible nitric oxide synthase , رزبنگال , ماکروفاژهای رده J۷۷۴A.۱ , التهاب , اکسید نیتریک , آنزیم نیتریک اکساید سنتاز القایی