استخراج و تخلیص لاکتوفرین از شیر شتر و بررسی فعالیت آمیلازی آن
Publish Year: 1401
نوع سند: مقاله ژورنالی
زبان: Persian
View: 64
This Paper With 5 Page And PDF Format Ready To Download
- Certificate
- من نویسنده این مقاله هستم
استخراج به نرم افزارهای پژوهشی:
شناسه ملی سند علمی:
JR_JMUMS-32-209_016
تاریخ نمایه سازی: 1 آبان 1402
Abstract:
سابقه و هدف: لاکتوفرین در ترشحات موکوسی، شیر و کلستروم یافت می شود و دارای فعالیت های ضدمیکروبی، جذب آهن و افزایش پاسخ های ایمنی می باشد. لاکتوفرین قابلیت تجزیه نشاسته و ATP را داراست. هدف از این مطالعه، بررسی حفظ فعالیت آنزیمی لاکتوفرین شیرشتر پس از خالص سازی توسط کروماتوگرافی تبادل یونی بود.
مواد و روش ها: در این تحقیق آزمایشگاهی پس از گرفتن شیر شتر، چربی و کازئین حذف و لاکتوفرین توسط کروماتوگرافی تبادل یونی با استفاده از CM-Sephadex-C-۵۰ خالص گردید. مقادیر Km و Vmax فعالیت آمیلازی لاکتوفرین، pH و دمای بهینه واکنش مشخص شد. بدین منظور از محلول ۵/۰ درصد نشاسته ذرت به عنوان سوبسترا و از آزمایش فعالیت یدی برای تعیین مقادیر مصرف نشده استفاده شد. دمای بهینه فعالیت آمیلازی توسط کروماتوگرافی کاغذی تعیین شد.
یافته ها: نتایج حاصل از بررسی، حضور لاکتوفرین را در محدوده ۷۳کیلودالتون و غلظت آن را به طور متوسط µg/ml۶۰ نشان داد. مقادیر Km و Vmax به ترتیب mg.ml-۱۲ وmg.ml-۱.min-۱ ۰/۲ تعیین شد. همچنین لاکتوفرین فعالیت آمیلازی گسترده ای در محدوده pH های ۴ تا ۷ داشت و بیش ترین فعالیت را در بpH برابر ۵ دارا بود. فعالیت آمیلازی لاکتوفرین در دمای C˚۴۰ به حداکثر مقدار خود رسید. هضم آنزیمی سبب هیدرولیز نشاسته و تبدیل آن به قندهای مالتوز و گلوکز شد.
استنتاج: بر اساس یافته های مطالعه حاضر روش کروماتوگرافی تبادل یونی می تواند سبب جداسازی لاکتوفرین با خلوص بالا گردد. فعالیت آمیلازی بالای لاکتوفرین نشان داد که ساختار پروتئینی آن پس از عبور از ستون کروماتوگرافی حفظ شده است.
Keywords:
Authors
سعید زیبائی
Associate Professor, Razi Vaccine and Serum Research Institute, Northeast Branch, Department of Research and Development of Biological Products, Agricultural Research, Education and Extension Organization (AREEO), Mashhad, Iran
انیس بخشانی
MSc in Cellular and Molecular Biology, Razi University of Kermanshah, Kermanshah, Iran
علی بید مشکی پور
Associate Professor, Department of Biology, Faculty of Science, Razi University of Kermanshah, Kermanshah, Iran
مراجع و منابع این Paper:
لیست زیر مراجع و منابع استفاده شده در این Paper را نمایش می دهد. این مراجع به صورت کاملا ماشینی و بر اساس هوش مصنوعی استخراج شده اند و لذا ممکن است دارای اشکالاتی باشند که به مرور زمان دقت استخراج این محتوا افزایش می یابد. مراجعی که مقالات مربوط به آنها در سیویلیکا نمایه شده و پیدا شده اند، به خود Paper لینک شده اند :