تولید آزمایشگاهی فاکتور رشد اپیدرم انسانی نوترکیب و ارزیابی عملکرد آن در بقای سلولی
Publish Year: 1394
نوع سند: مقاله ژورنالی
زبان: Persian
View: 72
This Paper With 11 Page And PDF Format Ready To Download
- Certificate
- من نویسنده این مقاله هستم
استخراج به نرم افزارهای پژوهشی:
شناسه ملی سند علمی:
JR_JMUMS-25-125_002
تاریخ نمایه سازی: 2 آبان 1402
Abstract:
سابقه و هدف: فاکتور رشد اپیدرم انسانی (hEGF)، پلی پپتیدی دارای ۵۳ اسید آمینه است که کاربردهای وسیعی در پزشکی و به ویژه ترمیم زخم دارد. هدف از این پژوهش، همسانه سازی، بیان و تخلیص hEGF نوترکیب و بررسی اثر میتوژنیک آن بر دودمان سلولی NIH۳T۳ بود.
مواد و روش ها: زیرهمسانه سازی ژن hEGF، درون وکتور pET۲۴a صورت گرفت. بیان پروتئین تحت شرایط استاندارد صورت گرفت. از آن جایی که بیان پروتئین به صورت کنجاله های نامحلول بود، محلول سازی ملایم با استفاده از بافری با pH قلیایی صورت گرفت. در نهایت و پس از ایجاد تاخوردگی مجدد، اثر میتوژنیک این پروتئین در غلظت های مختلف بر دودمان سلول NIH۳T۳مورد بررسی قرار گرفت.
یافته ها: محلول سازی ملایم کنجاله های نامحلول با بافر قلیایی و پس از آن انجام تاخوردگی مجدد دارای بازده بسیار بالایی بود. نتایج آزمون MTT، نشان داد که سلول های تیمار شده با فاکتور رشد اپیدرمی بیان شده در این تحقیق، پس از گذشت ۷۲ ساعت، به طور معنی داری درصد بقاء بیش تری نسبت به کنترل (۰۰۰۱/۰< P). نشان دادند.
استنتاج: به نظر می رسد که سیستم بیان سیتوپلاسمی به کار برده شده در این تحقیق، برای تولید فاکتور رشد اپیدرم انسانی نوترکیب زیست فعال کارامد باشد. روش ارائه شده در این تحقیق، روشی آسان، در دسترس، مقرون به صرفه و با بازده بالا برای محلول سازی کنجاله های نامحلول و به دست آوردن شکل زیست فعال فاکتور رشد اپیدرم انسانی می باشد.
Keywords:
Recombinant epidermal growth factor , solubilization , MTT assay , NIH ۳T۳ cell line , فاکتور رشد اپیدرم انسانی نوترکیب , محلول سازی , آزمون MTT , دودمان سلولی NIH۳T۳
Authors
سارا پورانوری
Ph.D in Molecular Genetics, Department of Biology, Islamic Azad University, Science and Research Branch, Tehran, Iran
فیروز ابراهیمی
Assistant Professor, Faculty of Basic Sciences, Biology Research Center, Imam Hussein University, Tehran, Iran
غلامرضا جوادی
Associate Professor, Department of Biology, Islamic Azad University, Science and Research Branch, Tehran, Iran
بزرگمهر مداح
Associate Professor, Department of Chemistry, Faculty of Basic Sciences, Imam Hussein University, Tehran, Iran
مراجع و منابع این Paper:
لیست زیر مراجع و منابع استفاده شده در این Paper را نمایش می دهد. این مراجع به صورت کاملا ماشینی و بر اساس هوش مصنوعی استخراج شده اند و لذا ممکن است دارای اشکالاتی باشند که به مرور زمان دقت استخراج این محتوا افزایش می یابد. مراجعی که مقالات مربوط به آنها در سیویلیکا نمایه شده و پیدا شده اند، به خود Paper لینک شده اند :