Normal
۰
false
false
false
EN-US
ZH-TW
AR-SA
MicrosoftInternetExplorer۴
چکیده
سابقه و هدف: باکتری E. coliO۱۵۷:H۷ جزء پاتوژن های روده ای می باشد که آسیب های جدی در دستگاه گوارش پدید می آورد. اتصال باکتری در روده بزرگ به واسطه یک سری از فاکتورهای
بیماری زا صورت می پذیرد که پروتئین های ترشحی نوع ۳ نیز جزء این فاکتورها دسته بندی می شوند. در بین پروتئین های موجود در سیستم مذکور، پروتئین EspA نقش اصلی و مهم را در پیکره شکل گیری این سیستم ایفا می کند. هدف از انجام این تحقیق همسان سازی و بیان این پروتئین به شکل نوترکیب
جهت دستیابی به یک ساختار و منبع پایدار برای تولید آن به منظور بررسی های آینده به عنوان کاندید واکسن می باشد.
مواد
و روش ها: طراحی پرایمر اختصاصی برای ژن espA توسط نرم افزار Oligo
۷ انجام شد و
تکثیر ژن توسط واکنش PCR از روی DNA الگو صورت پذیرفت. واکنش های
هضم آنزیمی و الحاق ژن درون وکتور بیانی pET۲۸a(+) انجام شد. پس از تایید همسان سازی ژن مورد نظر،
بیان نوترکیب پروتئین EspA با استفاده از القاءگر مصنوعی IPTG صورت پذیرفت. آنالیز
وسترن بلات نیز برای تایید پروتئین EspA صورت پذیرفت.
یافته ها: همسان سازی ژن espA درون وکتور pET۲۸a(+) به شکل مناسب بین جایگاه های مربوطه صورت پذیرفت و
پروتئین EspA پس از القا،
بیان نوترکیب مناسب و قابل توجهی را
نشان داد. آنتی بادی
مورد استفاده در
وسترن بلات نیز توانست به شکل مناسبی EspA را شناسایی کند.
استنتاج: ساختار نوترکیب پایدار محتوی ژن espA تولید
گردید که
بیان نوترکیب قابل توجهی از پروتئین را نشان داد. بنابراین پروتئین EspA را می توان در مطالعات آینده برای بررسی میزان ایمن سازی علیه E. coli O۱۵۷:H۷ مورد بررسی قرار داد.
/* Style Definitions */
table.MsoNormalTable
{mso-style-name:"Table Normal"
mso-tstyle-rowband-size:۰
mso-tstyle-colband-size:۰
mso-style-noshow:yes
mso-style-priority:۹۹
mso-style-qformat:yes
mso-style-parent:""
mso-padding-alt:۰cm ۵.۴pt ۰cm ۵.۴pt
mso-para-margin:۰cm
mso-para-margin-bottom:.۰۰۰۱pt
mso-pagination:widow-orphan
font-size:۱۱.۰pt
font-family:"Calibri","sans-serif"
mso-ascii-font-family:Calibri
mso-ascii-theme-font:minor-latin
mso-fareast-font-family:PMingLiU
mso-fareast-theme-font:minor-fareast
mso-hansi-font-family:Calibri
mso-hansi-theme-font:minor-latin
mso-bidi-font-family:Arial
mso-bidi-theme-font:minor-bidi}