ارزیابی مقایسه ای مایع کیست هیداتیک با سرم جنین گاو در محیط کشت سلول فیبروبلاست موش صحرایی

چکیده سابقه و هدف : متداولترین سرم مصرفی برای رشد بهتر سلول ها در محیط کشت، سرم جنین گاو می باشد. با توجه به قیمت گران این سرم، این مطالعه با هدف ارزیابی مایع کیست هیداتیک به عنوان جایگزین سرم جنین گاو در محیط های کشت سلول فیبروبلاست جدا شده از موش صحرایی انجام شد. مواد و روش ها: در این تحقیق تجربی از سلول های فیبروبلاست، ناحیه درم پوست ناحیه کشاله ران و شکم موش صحرایی استفاده شد. فیبروبلاست ها توسط آنزیم تریپسین ۲۵/۰ درصد از سایر سلول ها جدا شده و در محیط پایه RPMI حاوی ۲۰ درصد سرم جنین گاو (FBS) کشت داده شدند. پس از رشد و تکثیر کافی سلول ها، آن ها را جدا نموده و در چاهک های پلیت ۲۴ خانه ای به صورت سه رقت متوالی به ترتیب حاوی محیط کشت PRMI خالص و محیط کشت PRMI حاوی ۱۰ و ۲۰ درصد سرم جنین گاو به عنوان شاهد و محیط کشت PRMI حاوی۱۰ و ۲۰ درصد مایع کیست هیداتیک گوسفندی کشت داده شدند. سپس میزان تکثیر و بقاء سلول های فیبروبلاست تا سه روز متوالی به ترتیب با استفاده از میکروسکوپ معکوس(بررسی مورفولوژی) و رنگ حیاتی تریپان بلو ۴/۰ درصد (ارزیابی کمی) مورد بررسی قرارگرفت. یافته ها: سلول های فیبروبلاست در محیط های کشت RPMI با غلظت های ۱۰ و ۲۰ درصد سرم جنین گاو طی سه روز رشد و تکثیر طبیعی داشتند و میزان بقاء ۹۵درصد بود. در مقابل، سلول های فیبروبلاست در محیط های کشت حاوی مایع کیست هیداتیک با غلظت های ۱۰ و ۲۰ درصد، از حالت دوکی به شکل گرد تبدیل شدند و ۸۰ درصد آن ها طی سه روز متوالی زنده بودند. استنتاج: نتایج نشان داد که می توان تا ۷۲ساعت از مایع کیست هیداتیک به عنوان جایگزین برای سرم جنین گاو در محیط کشت RPMI و یا به عنوان محیط ترانسپورت (انتقال) برای نگهداری کوتاه مدت سلول های فیبروبلاست استفاده نمود.

Keywords:

Key words: Fibroblast cells , RPMI medium , hydatid cyst fluid (HCF) , fetal bovine serum (FBS) , rat , واژه های کلیدی: سلول های فیبروبلاست , محیط کشت , مایع کیست هیداتیک , سرم جنین گاو , موش صحرایی