مقایسه تاثیر Tumor Necrosis Factor-α، Monocyte Conditioned Medium و polyinosinic-polycytidylic acid در بلوغ سلول های دندریتیک

چکیده سابقه و هدف: برای تولید سلول های دندریتیک از مونوسیت های خون محیطی انسان، آزمایشگاه های مختلف عوامل بلوغ متفاوتی را به کار می برند. ما در این مطالعه تاثیر افزودن Poly(I-C) به عوامل بلوغ متداول یعنی MCM و TNF-α را در القاء پاسخ لنفوسیت های T مورد بررسی قرار دادیم. مواد و روش ها: مونوسیت های خون محیطی که پس از دو ساعت انکوباسیون در دمای C°۳۷ به فلاسک کشت چسبیده بودند به مدت چهار روز در حضورGM-CSF و IL-۴ کشت داده شده، در روز چهارم آنتی ژن توموری آلوژن و در روز پنجم عامل بلوغ شامل MCM و TNF-α به یک گروه و MCM، TNF-α و Poly(I-C) به گروه دیگر اضافه شد. مورفولوژی سلول های دندریتیک تولید شده با میکروسکوپ اینورت و فنوتیپ آن ها با استفاده از آنتی بادی های ضد CD۱۴،CD۸۳ و HLA-DR مورد ارزیابی قرار گرفت. عملکرد آن ها نیز از طریق سنجش قدرت فاگوسیتوز، القاء MLR و تولید سیتوکین توسط سلول های دندریتیک و لنفوسیت های T تحریک شده با آن ها صورت گرفت. یافته ها: بررسی نشان می دهد که در حضور MCM و TNF-α با و یا بدون Poly(I-C) سلول های دندریتیک با مورفولوژی یکسان تولید می شود. افزودن Poly(I-C) به عوامل بلوغ باعث کاهش بیان CD۱۴ و افزایش بیان CD۸۳ و HLA-DR می گردد. میزان MLR به مقدار اندکی افزایش یافته، درصد سلول های فاگوسیت کننده کاهش و در عوض MFI آن ها افزایش می یابد. از طرف دیگر افزودن Poly(I-C) باعث کاهش نسبت IL-۱۰ به IL-۱۲ در مایع رویی سلول های دندریتیک و کاهش نسبت IFN-γبه IL-۴ در مایع رویی سلول های T تحریک شده با همان سلول های دندریتیک می گردد. استنتاج: نتایج این مطالعه نشان داد افزودن Poly(I-C) به MCM و TNF-α باعث بلوغ بیشتر سلول های دندریتیک و هدایت لنفوسیت های تحریک شده با این سلول ها به طرف TH۲ می گردد.

Keywords:

Dendritic cell , Monocyte Conditioned Medium (MCM) , TNF-α , poly (I:C) , سلول های دندریتیک , MCM , TNF-α , poly (I-C)