تاثیر تک لایه های قطبی و غیر قطبی سلول های پوششی لوله رحم انسان بر تکوین جنین های دو سلولی موش

سابقه و هدف: بهبود رشد و تکوین جنین پستانداران در محیط ازمایشگاهی همواره مورد توجه بوده و در این ارتباط کارایی سیستم های هم کشتی جنین با سلول های سوماتیک به اثبات رسیده است. در مطالعه حاضر سیستم هم کشتی ویژه ای که در آن سلول های پوششی لوله رحم به حالت قطبی کشت شده است، مورد مطالعه قرار گرفته است.مواد و روش ها: نمونه های لوله رحم انسانی از بیماران تحت عمل برداشت رحم (hysterectomy) تهیه شد و سلول های پوششی آن به روش آنزیمی جدا گردید و بر روی سطوح پلاستیک (به حالت غیر قطبی) و ژل ECM (به حالت قطبی) کشت گردید. ماهیت پوششی سلول ها با روش ایمنی بافتی - شیمیایی و قطبی بودن آنها با روش میکروسکوپ الکترونی (Transmission Electron Microscopy) تایید شد. آنگاه جنین های دو سلولی موش NMRI به روش Flushing تهیه شد و سیستم های هم کشتی آن با سلول های کشت یافته بر روی پلاستیک (غیر قطبی) و ژل ECM (قطبی) ایجاد گردید. رشد و تکوین جنین ها به طور روزانه و به مدت ۹۶ ساعت در فرم های ویژه ای ثبت گردید و نتایج حاصل با روش آماری X۲ آنالیز شد در انتهای دوره کشت تعدادی بلاستوسیست از گروه های مختلف به روش افتراقی به منظور شمارش سلولی رنگ آمیزی گردید و نتایج آن با استفاده از آزمون One-way ANOVA مورد مقایسه قرار گرفت.یافته ها: نتایج ایمنی - بافتی - شیمیایی نشانگر ماهیت پوششی سلول های کشت یافته بود. مقاطع میکروسکوپ الکترونی قطبی بودن کامل سلول های کشت یافته بر روی ژل ECM را تایید کرد. این سلول ها استوانه ای شکل بوده و بر روی غشا پایه قرار داشتند و کمپلس اتصالی (به ویژه اتصال محکم) تشکیل شده بود؛ در حالی که سلول های کشت یافته بر روی پلاستیک (غیر قطبی) دوکی شکل بودند و اتصال شبه دسموزوم بین آن ها بر قرار بود. نتایج رشد و تکوین نشان داد که در تمام مدت ۹۶ ساعت دوره کشت، جنین های سیستم های هم کشتی در مقایسه با گروه شاهد تکوین بهتری دارند. مقایسه سیستم قطبی با غیر قطبی نشان داد که سیستم قطبی از لحاظ درصد تشکیل بلاستوسیست تفاوت معنی داری با غیر قطبی ندارد. نکته حایز اهمیت پر سلول بودن بلاستوسیست های سیستم قطبی نسبت به غیر قطبی بود و از این لحاظ دو سیستم تفاوت معنی داری داشتند.استنتاج: بلاستوسیست های رشد یافته بر روی سلول های قطبی لوله رحم انسان، سلول بیش تری در مقایسه با جنین های سیستم غیر قطبی کسب می کنند و پر سلول بودن بلاستوسیست نشانه ای از کیفیت بالای آن است.

Keywords:

Polarized , non-polarized , oviduct , monolayer mouce , emberyo , لوله رحم , سلول های پوششی