بیان فاکتور سلول بنیادی نوترکیب متصل به زیپ لوسین

چکیده سابقه و هدف فاکتور سلول بنیادی، یک سیتوکاین خونی است که از طریق تاثیر بر روی سلول های خونساز در تمایز سلول های پیش ساز خونی، بقا، تکثیر و تمایز ماست سل و هم چنین افزایش تکثیر و تهاجم سلول های توموری نقش ایفا می کند. زیپ لوسین به صورت نوترکیب یا طبیعی با تشکیل همودایمر در ساختار خود، باعث همو و یا هترو دایمریزاسیون انواع بسیاری از پروتئین های متصل به خود شده و می تواند اثری مطلوب در عملکرد یا پایداری آن ها داشته باشد. مطالعه انجام شده سعی در دایمریزاسیون فاکتور سلول های بنیادی نوترکیب و زیپ لوسین و بیان آن دارد. مواد و روش ها مطالعه حاضر از نوع تجربی بود. شامل بخش طراحی پروتئین نوترکیب توسط نرم افزارهای بیوانفورماتیک و بخش آزمایشگاهی می باشد. شاخص های مورد توجه در بخش طراحی از جمله ساختارهای پروتئینی توسط نرم افزارهای مختلف شامل PSIpred وChimera  و پایداری پروتئین نوترکیب توسط RAMPAGE بررسی شد. پس از تعیین جایگاه های برش آنزیمی توسط NEBcutter و بهینه سازی برای باکتری اریگامی توسط Optimizer ، ساخت توالی انجام شد. در ادامه کلون آن در باکتری TOP۱۰ و بیان پروتئین در باکتری اریگامی انجام گرفت. یافته ها نتایج حاصل از مطالعه های بیوانفورماتیک روی پروتئین نوترکیب Leucine Zipper / SCF، در برگیرنده شاخص های لازم جهت ساختار صحیح پروتئین و دارای امتیازی بالا از لحاظ پایداری در سلول زنده بود و در ادامه نتایج حاصل از بخش تجربی نشان از کلون و بیان موفق آن داشت. نتیجه گیری نتایج این مطالعه، همسانه سازی و بیان موفق پروتئین نوترکیب Leucine Zipper/SCF در میزبان اریگامی را تائید نمود.

Keywords:

Key words: Stem Cell Factor , Leucine Zippers , Recombinant Proteins , Dimerization , کلمات کلیدی: Stem Cell Factor , Leucine Zipper , پروتئین نوترکیب , دایمریزاسیون