تاثیر کیفی هم کشتی سلول های کیسه زرده با رده سلولی M۲-۱۰B۴ در حضور و غیاب اریتروپویتین بر تمایز آن ها به رده اریتروئیدی

چکید ه   سابقه و هدف   سلول های بنیادی خون ساز کیسه زرده به علت تکثیر زیاد و نداشتن آنتی ژن های وابسته به MHC برای مطالعات هماتوپویتیک مناسب تر هستند. با توجه به اثرات مثبت استفاده از سیستم هم کشتی در تمایز سلول های بنیادی، در این تحقیق سعی شد از رده سلول M۲-۱۰B۴ به همراه اریتروپویتین برای تمایز سلول های بنیادی کیسه زرده استفاده شود.   مواد وروش ها   کیسه زرده از موش های حامله ۱۰ روزه جدا گردید و با استفاده از سرنگ و سرسوزن های مختلف ( G ۱۹، G ۲۳ و G ۲۷) و آنزیم کلاژناز ۱/۰% و یا تریپسین ۲ ۵ /۰% دارای EDTA ۰۲/۰% به سلول های منفرد تبدیل شدند. سپس از سلول های رده M۲-۱۰B۴ که فعالیت میتوزی آن ها با میتومایسین متوقف شده بود برای هم کشتی استفاده شد و به محیط کشت حاوی ng/ml ۵ ۰ فاکتور سلول بنیادی و U/ml ۱ اریتروپویتین اضافه و در۳۷ درجه سانتی گراد و فشار ۵ درصد CO۲ نگهداری شد . بعد از گذشت یک هفته رشد و تمایز سلول ها ، بررسی و سنجش کلنی در محیط نیمه جامد و رنگ آ میزی بنزیدین صورت گرفت.   یافته ها   سلول ها برروی این رده سلولی به خوبی رشد و تکثیر یافتند. البته درمحیط حاوی اریتروپویتین، رشد بهتری نسبت به محیط فاقدآن صورت گرفته بود وسلول های بنزیدین مثبت یا رده اریتروئیدی یبیشتری مشاهده شد.   نتیجه گیری   می توان با انتخاب لایه پشتیبان مثل سلول های استرومایی مغزاستخوان و به کار بردن هورمون اریتروپویتین، درصد بیشتری رده اریتروئیدی به دست آورد، گرچه برای تعیین نوع خون سازی اولیه یا ثانویه نیازبه انجام تحقیقات تکمیلی است. کلمات کلیدی: سلول های کیسه زرده ، اریتروپویتین ، تمایز ، سلول های اریتروئیدی

Keywords:

Yolk sac cells , Erythropoietin , Differentiation , Erythroid cells , سلول های کیسه زرد , اریتروپویتین , تمایز , سلول های ارتیروئیدی