تولید و ارزیابی رده سلولی اپیتلیالی شکل از بافت باله ماهی آزاد دریای خزر (Salmo trutta caspius)

امروزه کشت سلول ابزار بسیار مفیدی برای پاسخ به بسیاری از سوالات در زمینه­ی زیست شناسی محسوب می­شود و کاربرد رده­های سلولی روز به روز در حال افزایش است. در این مطالعه تولید کشت اولیه و Cell line ماهی آزاد دریای خزر (Salmo trutta caspius) مورد بررسی قرار گرفت و دو روش کشت اولیه Explant و روش جداسازی آنزیمی به کمک آنزیم تریپسین به منظور تولید کشت اولیه استفاده شد. مهاجرت سلول از باله های سینه­ای، پشتی، دمی و مخرجی در روش Explant با یکدیگر مقایسه شد. تاثیر مدت زمان­های مختلف تماس با تریپسین بر روی سلول­ها با یکدیگر مقایسه شد. محیط کشت Leibovitz’s L-۱۵ به همراه %۲۰ FBS و %۱ Pen-Strep استفاده شد. به منظور ارزیابی رده تولید شده، از سلول­ها کاریوتیپ تهیه شد و در نهایت این سلول­ها با کمک DMSO فریز شدند و به دمای C˚۱۹۶- منتقل شدند. محاسبات کارایی کشت بافت نشان داد که باله سینه­ای با میانگین %۳۱/۷۱ بهترین باله به منظور تولید رده سلولی از این ماهی است. در مقایسه کلی بین روش­های کشت اولیه، در روش جداسازی آنزیمی با آنزیم تریپسین نسبت به روش Explant، سلول­های زنده بیش تری حاصل شد. عدد کروموزومی سلول­ها ۸۰=n۲ بود و درصد زنده­مانی بعد از گذشت یک ماه در ازت مایع  %۴/۸۴ بود . با توجه به اینکه این سلول­ها تا ۲۲ نوبت پاساژ و انجماد و ذوب متوالی، از قابلیت رشد خوبی برخوردار بوده­اند، از آن ها می توان در مطالعات مختلف استفاده کرد. این سلول­ها به عنوان  اولین رده سلولی Cell Strain) ) از آبزیان تولید شده در کشور در بانک سلول های جانوری مرکز ذخائر ژنتیکی و زیستی ایران (IBRC) با کدهای CS۲-۱، CS۲-۲ و CSe و شماره دستیابی ۳-IBRC C۱۰۱۹۰ نگهداری می شود.

تولید و ارزیابی رده سلولی اپیتلیالی شکل از بافت باله ماهی آزاد دریای خزر (Salmo trutta caspius) Keywords:

Caspian Salmon , Primary culture , Epithelial Cell Line