شناسایی و تعیین خصوصیات ژن گلوتاتیون اس- ترانسفراز کلاس Mu در ماهی سفید دریای خزر (Rutilus frisii kutum)

گلوتاتیون اس- ترانسفرازها (GSTs) یکی از آنزیم­های کلیدی فاز دوم متابولیسم داروها هستند که در سم­زدایی سلول­ها و متابولیسم استرس اکسیداتیو پروکاریوت­ها و یوکاریوت­ها نقش دارند و این کار را از طریق اتصال گلوتاتیون احیا به گزنوبیوتیک­ها انجام می­دهند. با توجه به نقش این آنزیم­ها در مقابله با آلودگی­های زیست محیطی و افزایش چشمگیر آلودگی دریای خزر در سال های اخیر، شناخت نقش و عملکرد این آنزیم­ها، ضروری به نظر می­رسد. هدف از این پژوهش شناسایی، توالی­یابی و تعیین خصوصیت ایزوفرم Mu گلوتاتیون اس- ترانسفراز (GSTM) ماهی­سفید دریای خزر است. مراحل استخراج RNA، ساخت cDNA تک رشته­ای و تکثیر ژن GSTM در PCR انجام شد. سپس ژن مورد نظر درون حامل pTZ۵۷R/T قرار گرفت. حامل نوترکیب، به روش ترانسفورماسیون شیمیایی به سلول­های مستعد E. coli DH۵α انتقال یافت. پس از استخراج حامل و توالی­یابی نوکلئوتیدی، توالی  GSTMبا ۶۲۵ نوکلئوتید به دست آمد. نتایج حاصل از هم ردیفی، حاکی از همسانی بالای ۸۹ درصد GSTM ماهی سفید با سایر گونه های خانواده کپورماهیان است که ناحیه N-terminal آن همسانی بالاتری را در مقایسه با ناحیه C-terminal نشان می­دهد. بیشترین آمینواسید موجود در ساختار GSTM لیزین است که نقش کلیدی را در ساختار گلوتاتیون اس- ترانسفراز بازی می­کند. توالی نوکلئوتیدی GSTM با شماره دسترسی KY۲۱۱۹۹۲ در پایگاه NCBI به ثبت رسید.

Keywords:

گلوتاتیون اس- ترانسفراز , کلا س Mu , دریای خزر , ماهی سفید