سیویلیکا را در شبکه های اجتماعی دنبال نمایید.

Login
PapersConferencesJournals

بررسی ویرایش ژن DAZL در ژنوم رویان بز بختیاری با استفاده از CRISPR/Cas۹ و تکنیک های انتقال هسته سلول سوماتیک

Publish place: Animal Production Research، Vol: 13، Issue: 2
Publish Year: 1403
Type: Journal paper
Language: Persian
View: 125

This Paper With 14 Page And PDF Format Ready To Download

DOWNLOAD Paper

Export:

Link to this Paper:
https://civilica.com/doc/2066249

Document National Code:

JR_ARGU-13-2_001

Index date: 7 September 2024

بررسی ویرایش ژن DAZL در ژنوم رویان بز بختیاری با استفاده از CRISPR/Cas۹ و تکنیک های انتقال هسته سلول سوماتیک abstract

CRISPR/Cas۹ در حال ایجاد تغییرات در مهندسی ژنوم و ویژگی­های مختلف دام به­ویژه صفات اقتصادی است. DAZL یک پروتئین حفاظت شده متصل به RNA است که برای تمایز و توسعه سلول­های زایا، ضروری است. نرهای ناک اوت شده برای این ژن، قادر به تولید اسپرم نیستند. هدف از این مطالعه، ایجاد رویان بز ناک اوت برای ژن DAZL بود. با استفاده از gRNA طراحی شده در وکتور PX۴۵۹، پلاسمیدها ساخته و کلون شدند. پلاسمید نوترکیب با استفاده از روش الکتروپوریشن به سلول­های فیبروبلاست منتقل شده و سلول­های ترانسفکت شده با تیمار پورمایسین انتخاب شدند. سلول های ویرایش شده از مسیر روند انتقال هسته سلول سوماتیک (شبیه­سازی)، به تخمک های بدون هسته متصل شده و سپس، همجوشی الکتریکی غشای سلولی اعمال شد. رویان­های حاصل از روند شبیه­سازی از نظر مراحل رویانی و رسیدن به مراحل تسهیم و بلاستوسیست بررسی شدند. نتایج بررسی بیان ژن، موفقیت تکنیک CRISPR/Cas۹ برای سرکوب ژن DAZL را نشان داد. نرخ تکوین بلاستوسیت حاصل از روند شبیه­سازی با سلول­های ناک اوت شده، تفاوت قابل توجهی با گروه شاهد نداشت. با کمک بررسی توالی­یابی ژنتیکی، میزان ناک اوت ژن DAZL در سلول فیبروبلاست، ۳/۸۳ و در بلاستوسیست های حاصل از شبیه­سازی، ۳/۵۵ درصد به­دست آمد. جهش ­ها از نوع INDEL و همگی به­شکل تغییر قالب خوانش پروتئین بودند که منجر به تغییر پروتئین می­شود. بلاستوسیت های تولید شده را می­توان برای انتقال به حیوان گیرنده و تولید بزهای ناک اوت شده برای ژن DAZL برای مطالعات بیشتر و بهینه­ سازی پیوند سلول­های بنیادی اسپرماتوگونیال استفاده کرد.

بررسی ویرایش ژن DAZL در ژنوم رویان بز بختیاری با استفاده از CRISPR/Cas۹ و تکنیک های انتقال هسته سلول سوماتیک Keywords:

بررسی ویرایش ژن DAZL در ژنوم رویان بز بختیاری با استفاده از CRISPR/Cas۹ و تکنیک های انتقال هسته سلول سوماتیک authors

احمد پیرعلی

دانشجوی دکتری ژنتیک و اصلاح دام و طیور، گروه علوم دامی ، دانشکده علوم کشاورزی، دانشگاه گیلان

سید حسین حسینی مقدم

دانشیار، گروه علوم دامی ، دانشکده علوم کشاورزی، دانشگاه گیلان

شاهین اقبال سعید

استاد، پژوهشگاه رویان، پژوهشکده زیست فناوری جهاددانشگاهی، مرکز تحقیقات علوم سلولی، گروه زیست فناوری جانوری، اصفهان، ایران

مهدی حاجیان

دانشیار، پژوهشگاه رویان، پژوهشکده زیست فناوری جهاددانشگاهی، مرکز تحقیقات علوم سلولی، گروه زیست فناوری جانوری، اصفهان، ایران

فرنوش جعفرپور

استادیار، پژوهشگاه رویان، پژوهشکده زیست فناوری جهاددانشگاهی، مرکز تحقیقات علوم سلولی، گروه زیست فناوری جانوری، اصفهان، ایران

مراجع و منابع این Paper:

لیست زیر مراجع و منابع استفاده شده در این Paper را نمایش می دهد. این مراجع به صورت کاملا ماشینی و بر اساس هوش مصنوعی استخراج شده اند و لذا ممکن است دارای اشکالاتی باشند که به مرور زمان دقت استخراج این محتوا افزایش می یابد. مراجعی که مقالات مربوط به آنها در سیویلیکا نمایه شده و پیدا شده اند، به خود Paper لینک شده اند :
Abdoli, R., Zamani, P., Mirhosseini, S. Z., Ghavi Hossein-Zadeh, N., ...
Hsu, P. D., Lander, E. S., & Zhang, F. (۲۰۱۴). ...
Li, T., Wang, X., Zhang, H., Chen, H., Liu, N., ...
Vogel, T., Speed, R. M., Ross, A., & Cooke, H. ...
نمایش کامل مراجع