تولید داروی نوترکیب آسپاراژیناز باکتری E.coli در مقیاس آزمایشگاهی
Publish place: The Journal of Isfahan Medical School، Vol: 40، Issue: 696
Publish Year: 1401
Type: Journal paper
Language: Persian
View: 55
This Paper With 7 Page And PDF Format Ready To Download
- Certificate
- I'm the author of the paper
Export:
Document National Code:
JR_IMSJ-40-696_002
Index date: 2 November 2024
تولید داروی نوترکیب آسپاراژیناز باکتری E.coli در مقیاس آزمایشگاهی abstract
مقاله پژوهشی مقدمه: L-asparaginase آنزیم دارویی برگرفته شده از باکتری اشرشیاکلی می باشد و یکی از داروهایی است که در درمان سرطان خون حاد لنفوبلاستیک به کار می رود. کاهش آسپاراژین خون بعد از استفاده از آنزیم آسپاراژیناز می تواند مرگ را برای این سلول ها به دنبال داشته باشد. هدف از این طرح، بررسی امکان تولید و تخلیص آنزیم آسپاراژیناز می باشد. روش ها: ژن آنزیم آسپاراژیناز موجود در ژنوم باکتری اشرشیاکلی با استفاده از تکنیک PCR تکثیر شد. پس از تخلیص، ژن فوق در وکتور pET۲۸a کلون و به میزبان باکتری انتقال داده شد. پس از ترانسفورماسیون، شرایط مختلف بیان پروتئین جهت بهینه سازی بررسی گردید. بیان آنزیم نوترکیب به کمک SDS-PAGE و وسترن بلات تایید شد. سپس آنزیم آسپاراژیناز با روش کروماتوگرافی تمایلی و با کمک ستون حاوی رزین Ni-NTA و روش هیبرید خالص شد و در نهایت فعالیت آنزیمی آن بررسی گردید. یافته ها: بیشترین میزان تولید آنزیم آسپاراژیناز در باکتری در دمای ۳۷ درجه ی سانتی گراد، غلظت ۱ میلی مولار از القاگر و زمان ۲۰ ساعت پس از القاء بود. آنزیم آسپاراژیناز نامحلول با استفاده از ستون نیکل خالص شده و روی ستون فرایند تاخوردگی مجدد (Refolding) انجام شد. با توجه به فعالیت آنزیم ریفولد شده در تست فعالیت آنزیمی می توان نتیجه گرفت فرایند تاخوردگی مجدد آنزیم به درستی انجام شده است. نتیجه گیری: به دلیل اهمیت زیاد تولید آنزیم آسپاراژیناز در ایران و نیاز گروهی از بیماران برای استفاده از این آنزیم، در این پروژه با بهینه کردن فرایند بیان و تخلیص، آنزیم L-asparaginase در مقیاس آزمایشگاهی تولید شد.
تولید داروی نوترکیب آسپاراژیناز باکتری E.coli در مقیاس آزمایشگاهی Keywords:
تولید داروی نوترکیب آسپاراژیناز باکتری E.coli در مقیاس آزمایشگاهی authors
زهرا زینلی
Pharmacy Student, School of Pharmacy and Pharmaceutical Sciences, Isfahan University of Medical Science, Isfahan, Iran
حمید باخرد
Assistant Professor, Department of Pharmaceutical Biotechnology, School of Pharmacy and Pharmaceutical Sciences, Isfahan University of Medical Sciences, Isfahan, Iran
مراجع و منابع این Paper:
لیست زیر مراجع و منابع استفاده شده در این Paper را نمایش می دهد. این مراجع به صورت کاملا ماشینی و بر اساس هوش مصنوعی استخراج شده اند و لذا ممکن است دارای اشکالاتی باشند که به مرور زمان دقت استخراج این محتوا افزایش می یابد. مراجعی که مقالات مربوط به آنها در سیویلیکا نمایه شده و پیدا شده اند، به خود Paper لینک شده اند :
