بیان نوترکیب پروتئین هماگلوتینین ویروس آنفلوانزا A (H۱N۱) خوکی سویه ی ایرانی در رده ی سلولی حشره با استفاده از سیستم باکولوویروس

مقدمه: ویروس آنفلوانزا، عامل بیماری آنفلوانزا است که به علت ایجاد اپیدمی های سالانه در بین طیف وسیعی از میزبان حیوانی و انسانی مورد توجه بوده است. هدف از انجام این مطالعه، بیان موثر و قوی پروتئین نوترکیب هماگلوتینین سویه ی ایرانی ویروس آنفلوانزا (H۱N۱)A خوکی در رده ی سلولی حشره ی Sf۹ به کمک سیستم بیانی باکولوویروس بود. روش ها: ژن هماگلوتینین ویروس آنفلوانزا H۱N۱ خوکی با پرایمر اختصاصی حاوی توالی آنزیم های برشی تکثیر و کلون گردید و سپس به منظور تولید یک بکمید نوترکیب با استفاده از سیستم Bac-to-Bac به سلول DH۱۰Bac انتقال داده شد. بیان و فعالیت پروتئین نوترکیب در سلول با استفاده از تکنیک های مولکولی مورد سنجش قرار گرفت. یافته ها: تولید ژن هماگلوتینین به طول ۱۷۰۱ جفت باز تایید و سلول حشره بعد از دریافت بکمید نوترکیب، پروتئینی به وزن تقریبی ۶۶ کیلودالتون را بیان نمود. اندازه ی سلول های آلوده شده و هسته آن ها افزایش یافت و با ایجاد ظاهر گرانولار، از سطح فلاسک کشت سلول جدا شدند. پس از گذشت ۴۸ ساعت از عفونت، سلول های آلوده، با جذب گلبول های قرمز جوجه، به شکل تجمعات سلولی ظاهر شدند. عدم تشکیل کلامپ سلولی، نشان از صحت آزمون و مهار فعالیت همادسورپشن بود. مقدار پروتئین حاصل معادل ۷۶/۱۰ میکروگرم بر ۱۰۰ میکرولیتر معادل ۱/۰ میلی گرم/میلی لیتر گزارش شد. نتیجه گیری: طبق نتایج سیستم بیانی باکولوویروس، قادر به بیان پروتئین نوترکیب در سلول حشره بود و بنابراین، راه حل مناسبی برای جایگزین کردن آن به عنوان نسل جدید واکسن به جای واکسن های مبتنی بر تخم مرغ و یا کشت سلول می باشد.

بیان نوترکیب پروتئین هماگلوتینین ویروس آنفلوانزا A (H۱N۱) خوکی سویه ی ایرانی در رده ی سلولی حشره با استفاده از سیستم باکولوویروس Keywords:

ویروس آنفلوانزا H۱N۱ , هماگلوتینین , حشره , باکولوویروس , واکسن