بررسی تغییرات بیان ژن G-CSF و ISG-۱۵ در سلول های چند هسته ای خون محیطی گاوهای آبستن و مبتلا به مرگ رویانی abstract
سابقه و هدف: از دست دادن آبستنی در مراحل مختلف آبستنی می تواند به دلایل مختلفی اتفاق بیفتد، اما افزایش میزان مرگ و میر رویانی در مراحل اولیه آبستنی یکی از چالش های صنعت پرورش گاو شیری در حال حاضر است. محرک کلونی گرانولوسیت هاG-CSF) ) یکی از سایتوکاین های خونساز است که عمدتا توسط سلول های منوسیت و ماکروفاژ تولید و موجب تکثیر و تمایز سلول های خونساز میلوییدی می شود. ISG-۱۵ به عنوان یک همولوگ یوبیکویتین داخل سلولی و نیز به عنوان یک سایتوکاین خارج سلولی عمل می کند که ممکن است به عنوان یک نشانگر اولیه آبستنی در نشخوارکنندگان عمل کند. این سایتوکاین ها همزمان با تولید اینترفرون ها در رحم در خون محیطی افزایش می یابند. در مطالعه حاضر تشخیص آبستنی در مراحل اولیه آن توسط سایتوکاین هایی از جمله G-CSFو ISG-۱۵ مورد بررسی قرار گرفت. لذا هدف از این پژوهش، مقایسه تغییرات بیان این ژن در دام های آبستن ، غیرآبستن دچار مرگ زودرس یا دیررس جنینی در گاو شیری است. مواد و روش ها: نمونه خون از ۳۰ راس دام مبتلا به مرگ رویانی( برای هر گروه زمانی ۱۰ راس) و ۳۰ راس دام آبستن طبیعی( برای هر گروه زمانی ۳۰ راس) در لوله های خلا حاوی ماده ضد انعقاد EDTA، در روزهای ۱۵ تا ۲۴، ۲۵ تا ۳۴ و ۳۵ تا ۴۴ پس از تلقیح اخذ شد. دام ها به دو گروه آبستن و غیرآبستن بر اساس غلظت پروژسترون در روز ۲۱ تقسیم شدند، سپس گاوهای غیرآبستن نیز به دام ها با مرگ زودرس جنین (روز ۱ تا۲۶) و مرگ دیررس جنین (روز ۲۶ تا ۴۵) طبقه بندی شدند. سپس نسبت به استخراج نوتروفیل ها از نمونه خون اقدام و بیان ژن G-CSF وISG-۱۵ با استفاده از تکنیک Real-Time PCR اندازه گیری شد. یافته ها: نتایج نشان داد غلظت پروژسترون در پلاسمای خون گاوهای آبستن در فاصله ی زمانی ۱۵ تا ۲۴، ۲۵ تا ۳۴ و ۳۵ تا ۴۴ روز بعد از تلقیح مصنوعی به طور معنی داری نسبت به گاوهای غیرآبستن بیشتر بود. غلظت گلوکز در پلاسمای خون گاوهای آبستن، در فاصله زمانی ۱۵ تا ۲۴ نسبت به فواصل زمانی ۲۵ تا ۳۴ و ۳۵ تا ۴۴، به طور معنی داری نسبت به غلظت گلوکز پلاسمای خون گاوهای غیرآبستن بالاتر بود (۰۰۱/۰P<). غلظت کلسترول در فاصله ی زمانی ۲۵ تا ۳۴ بعد از تلقیح مصنوعی در پلاسمای گاوهای آبستن تفاوت آماری معنی داری (۰۵/۰P<) با غلظت کلسترول در پلاسمای خون گاوهای غیرآبستن داشت. بررسی غلظت تری گلیسرید در پلاسمای خون گاو آبستن در فاصله زمانی ۱۵ تا ۲۴، ۲۵ تا ۳۴ و ۳۵ تا ۴۴ روز بعد از تلقیح تفاوت آماری معنی داری با غلظت تری گلسیرید پلاسمای خون گاوهای غیرآبستن در همان روزها نداشت (۰۵/۰P<). بیشترین مقدار بیان ژن G-CSF در فاصله زمانی ۱۵ تا ۲۴ در نوتروفیل خون گاوهای آبستن مشاهده شد. همچنین، بیشترین مقدار بیان ژن ISG-۱۵ در فاصله زمانی ۳۵ تا ۴۴ روز بعد از تلقیح مشاهده شد. نتیجه گیری: نتایج این مطالعه نشان داد این ژن ها می توانند به عنوان تشخیص مرگ زودرس و دیررس جنینی کاربرد بالینی داشته باشند