غربالگری و شناسایی باکتری های تجزیه کننده سلولز از خاک و کلون سازی ژن مربوط به آنزیم اندوگلوکاناز
Publish place: Modares Journal of Biotechnology، Vol: 14، Issue: 2
Publish Year: 1402
Type: Journal paper
Language: Persian
View: 39
This Paper With 17 Page And PDF Format Ready To Download
- Certificate
- I'm the author of the paper
Export:
Document National Code:
JR_BIOT-14-2_006
Index date: 24 December 2024
غربالگری و شناسایی باکتری های تجزیه کننده سلولز از خاک و کلون سازی ژن مربوط به آنزیم اندوگلوکاناز abstract
امرزه استفاده از بیوکاتالیست ها در صنعت اهمیت فراوانی دارد. چون آنها واکنش های شیمیایی را با صرف کمترین انرژی و بالاترین بازده انجام می دهند. در این بین آنزیم های باکتریایی با توجه به روش آسان کلون سازی و بیان بالای پرتئین ها در میزبان قابل دستورزی اهمیت خاصی دارند. آنزیم سلولاز فراوانترین پلیمر موجود در طبیعت را به واحدهای گلوکز هیدرولیز می کند. گلوکز تولید شده از این روش می تواند کاربردهای متنوع داشته باشد از جمله تولید سوخت زیستی، شیرین کننده در صنایع غذایی و تولید اتانول. با توجه به کاربرد گسترده این آنزیم، در سال های اخیر کلون سازی و تولید آن در میزبان های دستورزی شده گسترش یافته است. این مطالعه به منظور جداسازی، غربالگری و شناسایی سویه های بومی تولید کننده آنزیم اندوگلوکاناز از نمونه های خاک اطراف ریشه درخت افرا در منطقه شمال کشور انجام شد. سویه های جدا شده با استفاده از توالی یابی ژن ۱۶S rRNA شناسایی شدند. پس از شناسایی نوع باکتری(Enterobacter hormaechei) ، تکثیر ژن آنزیم اندوگلوکاناز ابتدا توسط آغازگرهای دژنره و سپس توسط آغازگرهای اختصاصی دارای توالی های برشی انجام شد و الحاق ژن در پلاسمید مناسب با استفاده از آنزیم های برشی و الحاقی مناسب صورت گرفت. سپس پلاسمید نوترکیب حاصل به میزبان E.coli BL-۲۱ منتقل شد و بیان پروتئین هدف با تحریک اوپران لک در غلظت mM ۱ IPTG انجام گرفت. ثابت های کینتیکی آنزیم از جمله Vmax و Km به ترتیب برابر با ۴۵ میکرومول در دقیقه و ۴/۱ میلی گرم در میلی لیتر محاسبه گردید. بهینه شرایط فعالیت آنزیم نوترکیب تولید شده در دمای °C۳۷ و pH ۷ می باشد.
غربالگری و شناسایی باکتری های تجزیه کننده سلولز از خاک و کلون سازی ژن مربوط به آنزیم اندوگلوکاناز Keywords:
غربالگری و شناسایی باکتری های تجزیه کننده سلولز از خاک و کلون سازی ژن مربوط به آنزیم اندوگلوکاناز authors
آرزو معرفت
Department of Animal Biology, Faculty of Natural Science, University of Tabriz, Tabriz, Iran
لیلا صادقی
Department of Animal Biology, Faculty of Natural Science, University of Tabriz, Tabriz, Iran
غلامرضا دهقان
Department of Animal Biology, Faculty of Natural Science, University of Tabriz, Tabriz, Iran
مراجع و منابع این Paper:
لیست زیر مراجع و منابع استفاده شده در این Paper را نمایش می دهد. این مراجع به صورت کاملا ماشینی و بر اساس هوش مصنوعی استخراج شده اند و لذا ممکن است دارای اشکالاتی باشند که به مرور زمان دقت استخراج این محتوا افزایش می یابد. مراجعی که مقالات مربوط به آنها در سیویلیکا نمایه شده و پیدا شده اند، به خود Paper لینک شده اند :
